植物乳桿菌抗菌作用及其應(yīng)用初探.pdf

1、利用乳酸菌發(fā)酵食品有著悠久的歷史，經(jīng)乳酸菌發(fā)酵加工后的食品不僅可以改善食品風(fēng)味，提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，而且還具有特殊營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和生理活性。大量研究表明，乳酸菌可以調(diào)節(jié)機(jī)體胃腸道正常菌群，從而抑制腸道內(nèi)腐敗菌生長(zhǎng)和腐敗產(chǎn)物的產(chǎn)生；其產(chǎn)生的細(xì)菌素等代謝產(chǎn)物，還有抑制病菌生長(zhǎng)等功效。因其具有高效、無(wú)毒、無(wú)殘留、無(wú)抗藥性等優(yōu)勢(shì)，應(yīng)用到飼料中可有效改善肉質(zhì)、提高飼料轉(zhuǎn)化率。
　　 本實(shí)驗(yàn)室篩選并分離出一株乳酸菌，對(duì)其的生理生化特征研究表明它與植物乳

2、桿菌(Lactobacillus plantarum)最為相似，我們將其命名為L(zhǎng)actobacillus plantarum ZJ316。而產(chǎn)生的細(xì)菌素則命名為Plantaricin ZJ316。本文主要針對(duì)該細(xì)菌素的分離純化及應(yīng)用做了初步研究，內(nèi)容包括：
　　 植物乳桿菌ZJ316抑菌譜的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該菌株具有廣譜抑菌性，后經(jīng)雙層平板拮抗法的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)其還具有抗真菌的能力。
　　 繼而進(jìn)行植物乳桿菌ZJ316細(xì)菌

3、素的分離純化。首先采用雙水相萃取法進(jìn)行初步分離，PEG/硫酸銨體系的最佳萃取條件是PEG4000濃度為17.5％、(NH4)2SO4濃度為19％、氯化鈉濃度是1％，pH值為3.75，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，在此條件下萃取相的效價(jià)為：287.56IU/mL。PEG/硫酸鈉雙水相體系萃取細(xì)菌素的最佳實(shí)驗(yàn)條件是PEG分子量為1000，濃度為17％，硫酸鈉的濃度為15％，氯化鈉的濃度為1.0％，pH為3.5，經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，在此條件下萃取相效價(jià)為：256IU/

4、mL。
　　 選擇離子柱繼續(xù)分離純化。經(jīng)試驗(yàn)確認(rèn)，選取pH為5.0的醋酸鈉緩沖液，DEAE Sepharose FF填料進(jìn)行純化分離，最終獲得了較純的細(xì)菌素組分。之后采用Trcine-SDS-PAGE電泳檢測(cè)，根據(jù)電泳結(jié)果初步估計(jì)植物乳桿菌素ZJ316的分子量大約在6.5kDa左右，屬于小分子多肽類(lèi)物質(zhì)。
　　 初步探索植物乳桿菌ZJ316作為飼料添加劑應(yīng)用于仔豬飼喂試驗(yàn)。結(jié)果表明：添加乳桿菌ZJ316飼喂的仔豬日增重、