草魚體內(nèi)三種氟喹諾酮類藥物的殘留檢測研究.pdf

1、氟喹諾酮類(fluoroquinolones，F(xiàn)QNS)藥物屬第三代喹諾酮類抗菌藥，對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性桿菌和球菌以及淋球菌具有高度的抗菌活性：對某些衣原體、螺旋體、支原體和厭氧菌也有極強(qiáng)的抑制作用，已廣泛用于治療畜禽和水生動物的細(xì)菌等感染性疾病。氟喹諾酮類藥物在水產(chǎn)品中的殘留已成為人們普遍關(guān)注的一個(gè)熱點(diǎn)。該類藥物在水產(chǎn)品中的殘留不但對人類及環(huán)境造成一定危害，而且也直接影響我國水產(chǎn)品的出口創(chuàng)匯、市場競爭力及社會效益等。因此對此類藥

2、物在水產(chǎn)品中的殘留進(jìn)行檢測與監(jiān)控勢在必行。 本文分為三部分。 第一部分：對草魚肌肉中藥物的提取、濃縮、凈化等環(huán)節(jié)進(jìn)行了篩選，并對流動相、檢測器和檢測波長等色譜條件進(jìn)行了選擇與優(yōu)化，以甲磺酸達(dá)氟沙星作內(nèi)標(biāo)物，在國標(biāo)方法的基礎(chǔ)上，建立了草魚肌肉組織中諾氟沙星、恩諾沙星和環(huán)丙沙星HPLC-FLD多殘留檢測方法。結(jié)果顯示，以磷酸-乙腈作提取液，55℃真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，用液-液萃取處理，正己烷脫脂凈化，磷酸-乙腈作流動相，配備熒光

3、檢測器(激發(fā)波長280 nm，發(fā)射波長450 nm)，在0.01-10μg/g范圍內(nèi)線性良好，提取回收率為79.89％～99.45％，方法回收率為97.60％～102.34％，日內(nèi)變異系數(shù)在4％以內(nèi)，日間變異系數(shù)在7％以內(nèi)，檢測限均為0.006μg/g。此方法的建立為開展上述藥物在草魚肌肉中的殘留檢測以及殘留消除規(guī)律的研究奠定了基礎(chǔ)。 第二部分：采用所建立的多殘留檢測方法，對重慶市部分地區(qū)水產(chǎn)市場草魚肌肉中的諾氟沙星、恩諾沙星、

4、環(huán)丙沙星的殘留進(jìn)行了檢測。檢測結(jié)果顯示，重慶榮昌梅石壩魚苗養(yǎng)殖場未檢出陽性樣品，北碚歇馬農(nóng)貿(mào)市場、長壽、潼南、萬州和墊江水產(chǎn)市場檢出有陽性樣品，但陽性檢出率低于8％，殘留量低于國家規(guī)定的最高殘留限量。表明以上地區(qū)在養(yǎng)殖草魚上使用這3種藥物較為規(guī)范。 第三部分：采用所建立的檢測方法，對恩諾沙星及其代謝物環(huán)丙沙星在草魚肌肉組織中的殘留消除規(guī)律進(jìn)行了研究。試驗(yàn)?zāi)M水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)際，將恩諾沙星制成藥餌，以40 mg/kg(魚體重)的劑量投喂

5、藥餌，連用5天。分別于每天最后一次給藥后3h及停藥后3 h，6 h，12 h，24h，48h，96h，144h，192h，240h，288h，384h，528h，720h，960h，1104h，1176h采樣，每次采集魚5尾，去鱗，沿背脊取肌肉(包括皮膚)，處理樣品，按HPLC-FLD檢測。 結(jié)果顯示，恩諾沙星、環(huán)丙沙星在草魚肌肉組織中的藥－時(shí)數(shù)據(jù)均能較好地用二室模型擬合。恩諾沙星、環(huán)丙沙星在草魚肌肉組織中的主要藥動學(xué)參數(shù)分別為

6、：T1/2(吸收半衰期)為7.085 h、183.606 h，Tmax(達(dá)峰時(shí)間)為5.635 h、4A98 h，Cmax(峰濃度)7.045 μ/g、0.188μg/g，AuC(藥時(shí)曲線下面積)為366.045 μg．h/g、30.927 μg．h/g，VB(表觀分布容積)為68.000L/kg、0.918 L/kg，T2/2(消除半衰期)為86.265 h、3.281 h，CLB(體清除率)為0.546 g，(kg．h)、0.194