三種氯霉素類藥物在對蝦體內(nèi)殘留消除的研究.pdf

1、本文以凡納濱對蝦為研究對象，建立了同時檢測對蝦中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的HPLC-UVD法；建立了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時檢測對蝦中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代謝物氟苯尼考胺的方法；研究了上述三種氯霉素類藥物在對蝦養(yǎng)殖和加工過程中的殘留消除規(guī)律。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1、建立了對蝦中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的HPLC-UVD法
　　以2％堿性乙酸乙酯作為提取溶劑，正己烷脫脂后可直接經(jīng)高效液相色譜進行分析

2、。氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考在0.10～10.00mg/L范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。在添加濃度為0.25～5.00mg/kg時，平均回收率為81.00～102.93%，RSD為1.95～7.10%。氯霉素的檢出限為0.01mg/kg，甲砜霉素和氟苯尼考的檢出限為0.02mg/kg。
　　2、建立了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測對蝦中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代謝產(chǎn)物氟苯尼考胺的方法
　　以2%堿性乙酸乙酯提取，省去固相萃?。?/p>

3、SPE）和液-液萃取（LPE）脫脂，濃縮后采用甲醇和5mmol/L乙酸銨溶液以0.25mL/min流速梯度洗脫，LC-MS/MS電噴霧電源（ESI），負離子，選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM）模式檢測。結(jié)果表明：三種藥物及代謝物在0.1～20μg/L的范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)R2為0.9997～0.9998。在添加濃度為1.00～5.00μg/kg時，平均回收率為78.17%～99.86%，RSD為2.18%～9.27%。氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考

4、和氟苯尼考胺的檢出限分別為：0.001μg/kg、0.020μg/kg、0.002μg/kg和0.003μg/kg。
　　3、研究了三種氯霉素類藥物在對蝦養(yǎng)殖過程中的殘留消除規(guī)律
　　在試驗水溫28～30℃，1.7～2.0%的鹽度條件下，用分別含0.5g/kg、1.0g/kg和2.0g/kg三個不同劑量氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的飼料連續(xù)投喂10天，每天2次，研究氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代謝物氟苯尼考胺在凡納濱對蝦血液

5、、肌肉和肝胰腺組織中的殘留消除規(guī)律。殘留藥物經(jīng)提取后用HPLC-MS/MS檢測。結(jié)果表明：（1）在給藥期間，各劑量組三種氯霉素類藥物在凡納濱對蝦肌肉、血液和肝胰腺中的殘留量隨著給藥時間的延長含量逐漸增大，并在第10天達到最大值。最高劑量組的肝胰腺組織殘留量最大，氯霉素為1827.89μg/kg，甲砜霉素為3710.00μg/kg，氟苯尼考為845.43μg/kg。（2）在停藥期間，各劑量組三種氯霉素類藥物在凡納濱對蝦肌肉、血液和肝胰腺組

6、織中的殘留隨著停藥天數(shù)的延長含量逐漸減少。高劑量組比低劑量組消除時間長，肝胰腺比血液和肌肉的消除時間長。氟苯尼考胺在對蝦各組織中未檢出。停藥2～5天后，對蝦各組織中三種藥物殘留量均在檢出限以下。結(jié)合軟件擬合的研究結(jié)果，三種藥物在對蝦體內(nèi)的休藥期為5天。
　　4、研究了加工工藝對三種氯霉素類藥物在蝦肉中消除的影響
　　研究了五種加工工藝對蝦肉糜中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考消除的影響?？瞻孜r肉中添加含三種氯霉素類藥物的標準溶液制

7、成含2.0μg/g劑量，5g大小的蝦肉丸。蝦肉丸中三種氯霉素類藥物殘留用HPLC-UVD法檢測。用蒸、水煮、烘烤、油炸和微波加熱五種工藝處理蝦肉丸一定時間。（1）蒸8min后蝦肉丸中三種氯霉素類藥物殘留量下降了41.99～44.50%，水煮8min后三種氯霉素類藥物殘留量下降了53.93～56.19%，烘烤4min后三種氯霉素類藥物殘留量下降了93.31～95.47%，油炸4min后三種氯霉素類藥物殘留量下降了93.30～94.91%，