三種抗菌藥物對(duì)大菱鲆的免疫影響及消除規(guī)律研究.pdf

1、本文研究的目的是評(píng)價(jià)氟苯尼考、土霉素、磺胺間甲氧嘧啶對(duì)大菱鲆免疫系統(tǒng)影響及藥物在魚體內(nèi)的殘留和消除規(guī)律，為水產(chǎn)動(dòng)物疾病防治中藥物合理使用和水產(chǎn)動(dòng)物的食品安全控制提供理論依據(jù)。 1.三種抗菌藥物對(duì)大菱鲆生理及生化指標(biāo)的影響以大菱鲆作為試驗(yàn)對(duì)象，研究三種不同劑量的抗菌藥物：氟苯尼考、土霉素和磺胺間甲氧嘧啶對(duì)大菱鲆生理和生化指標(biāo)的影響。生理指標(biāo)結(jié)果表明：土霉素和磺胺間甲氧嘧啶200mg/kg劑量組對(duì)血細(xì)胞及血紅蛋白的含量影響較大；20

2、0mg/kg土霉素和磺胺間甲氧嘧啶會(huì)使紅細(xì)胞和血紅蛋白的含量明顯下降，100mg/kg氟苯尼考及100mg/kg、200mg/kg土霉素和磺胺間甲氧嘧啶使白細(xì)胞含量明顯下降：三種藥物在不同劑量下均會(huì)使血栓細(xì)胞的數(shù)量明顯下降，影響凝血。生化指標(biāo)結(jié)果表明：給藥期間，土霉素和磺胺間甲氧嘧啶試驗(yàn)組谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和乳酸脫氫酶(LDH)的含量明顯升高，但各藥物組的高、低劑量組之間差異不顯著，停藥后，酶的活性開始下降，氟苯

3、尼考組各種酶的含量在各采樣點(diǎn)變化不明顯。各藥物組尿素氮和肌苷的含量隨劑量的增加和給藥時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，各藥物組尿素氮和肌苷的含量上升的幅度關(guān)系：氟苯尼考<土霉素<磺胺間甲氧嘧啶。 2.三種抗菌藥物對(duì)大菱鲆組織病理和生長(zhǎng)的影響以劑量50mg/kg、100mg/kg的氟苯尼考和100mg/kg、200mg/kg的土霉素和磺胺問甲氧嘧啶給大菱鲆口服10d，進(jìn)行三種抗菌藥物對(duì)大菱鲆的組織結(jié)構(gòu)和生長(zhǎng)的影響。組織結(jié)構(gòu)影響試驗(yàn)表明：較低濃度的

4、抗菌藥物對(duì)大菱鲆肝臟和腎臟組織結(jié)構(gòu)變化不明顯，但較高的劑量時(shí)對(duì)肝臟和腎臟的組織結(jié)構(gòu)影響較大，土霉素200mg/kg劑量組造成大菱鲆肝結(jié)構(gòu)疏松，肝細(xì)胞萎縮、變形；磺胺間甲氧嘧啶200mg/kg劑量組造成肝細(xì)胞腫脹、變形、細(xì)胞核萎縮；200mg/kg劑量的磺胺間甲氧嘧啶和土霉素均能造成腎臟組織結(jié)構(gòu)疏松、變形。生長(zhǎng)影響試驗(yàn)表明：50mg/kg氟苯尼考對(duì)大菱鲆的生長(zhǎng)沒有明顯影響，100mg/kg的氟苯尼考、100mg/kg、200mg/kg的土

5、霉素和磺胺間甲氧嘧啶均對(duì)大菱鲆的生長(zhǎng)造成明顯影響，但這種影響是暫時(shí)的，在停藥50d后，藥物對(duì)生長(zhǎng)所造成的影響即可消除。 3.三種抗菌藥物及左旋咪唑?qū)Υ罅怫姨禺愋悦庖咝Ч挠绊懡o大菱鲆連續(xù)一周口灌磺胺間甲氧嘧啶、土霉素、氟苯尼考和左旋咪唑，給藥劑量分別為100mg/kg、100mg/kg、20mg/kg、10mg/kg。第8d腹腔注射免疫大菱鲆0.2ml，疫苗為通過0.3％福爾馬林滅活制備的鰻弧菌疫苗。對(duì)照組注射等量的PBS。每周

6、采血1次，通過測(cè)定白細(xì)胞數(shù)量、血清蛋白含量、血清抗體水平及對(duì)鰻弧菌的免疫保護(hù)率比較四種藥物對(duì)免疫后的大菱鲆特異、非特異免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示：各測(cè)試的免疫指標(biāo)在實(shí)驗(yàn)的第1周都有所抑制，但從第2周開始都不同程度的恢復(fù)?；前烽g甲氧嘧啶和土霉素對(duì)免疫系統(tǒng)的影響較強(qiáng)，氟苯尼考對(duì)免疫系統(tǒng)影響最小。左旋咪唑促進(jìn)白細(xì)胞水平及蛋白含量，但未促進(jìn)抗體效價(jià)?；前烽g甲氧嘧啶與疫苗一起使用后其免疫保護(hù)率較單獨(dú)使用疫苗組下降了10％，左旋咪唑則提高了10％

7、，其他組調(diào)節(jié)作用不明顯。推薦氟苯尼考與疫苗同時(shí)使用，可以預(yù)防免疫后可能面對(duì)的爆發(fā)性敏感癥，左旋咪唑亦可作為免疫增強(qiáng)劑與疫苗同時(shí)使用。 4.三種抗菌藥物在大菱鲆體內(nèi)的代謝及消除規(guī)律研究本文研究在溫度為23℃，大菱鲆連續(xù)5d口服劑量為30mg/kg、100mg/kg、100mg/kg氟苯尼考、土霉素和磺胺間甲氧嘧啶，三種抗菌藥物在魚體內(nèi)的殘留和消除規(guī)律。分別于第1次給藥后的24、48、72、96、100、104、108、112、11

8、6、120、144、168、216、264、312、408、504、600、696、792、888、984h取樣，高效液相色譜法測(cè)定血液、肌肉、皮膚、肝臟和腎臟五種組織中的藥物濃度。結(jié)果表明：氟苯尼考在血液、肌肉、皮膚、肝臟和腎臟5種組織中的消除速率常數(shù)B和消除半衰期(t1/2)分別為0.0284、0.0283、0.0221、0.0233、0.0261和24.40、24.5、31.4、29.7、26.6h，消除曲線方程為Co)=39.0

9、27 e0.0248t、C(t)=47.204 e-0.0283t、 C(t)=22.826 e-00221t、 C(t)=43.171 e-0.0233t、 C(t)=19.917 e-0.0261t，土霉素在血液、肌肉、皮膚、肝臟和腎臟5種組織中的消除速率常數(shù)B和消除半衰期(t1/2)分別為0.0145、0.0130、0.0123、0.0116、0.0085和47.79、53.31、56.34、59.74、81.53h，消除曲線方程

10、為C(t)=27.674 e-0.0145t、C(t)=22.334 e-0.013t、C(t)=236.22 e-0.0123t、C(t)=44.208 e-0.0116t和C(t)=28.081 e-0.085t，磺胺間甲氧嘧啶在血液、肌肉、皮膚、肝臟和腎臟5種組織中的消除速率常數(shù)β和消除半衰期(t1/2)分別為0.0261、0.0276、0.0239、0.0111、0.0145和26.55、25.10、29.00、62.43、47

11、.79h，消除曲線方程為C(t)=480.39 e-0.0261t，C(t)=732.34 e-0.0276t，C(t)=248.01 e-0.0239t，C(t)=38.683 e--0.0111t和C(t)=53.951 e-0.0145t；氟苯尼考在組織中的濃度高低分別為腎臟>肝臟>肌肉>血液>皮膚，土霉素在組織中殘留的濃度高低分別為肝臟>腎臟>皮膚>血液>肌肉，磺胺間甲氧嘧啶在組織中殘留的濃度高低分別為肌肉>血液>皮膚>肝臟>腎

12、臟；三種抗菌藥物在大菱鲆肌肉組織中的濃度降低到0.01，0.02，0.05，0.1和0.21.tg/g時(shí)的理論時(shí)間：氟苯尼考為12、11、10、9和8d，土霉素為25、22、20、17和15d，磺胺間甲氧嘧啶為12、11、9、8和7d，氟苯尼考、土霉素和磺胺間甲氧嘧三種抗菌藥物在肌肉組織中的最高殘留限量分別為0.2、0.1和0.1μg/g，建議在溫度為23℃，氟苯尼考、土霉素和磺胺間甲氧嘧啶肌肉組織中的理論休藥期為10、20和10d。