雞肉中氟喹諾酮類殘留MSPD-HPCE檢測(cè)方法研究.pdf

1、氟喹諾酮類藥物(FQs)是一類人工合成的抗菌藥,已被世界各國(guó)廣泛用于畜禽和水生動(dòng)物疾病的防治。由于藥物的不合理使用,會(huì)造成動(dòng)物可食性組織中殘留,除了本身具有毒副作用外,還會(huì)產(chǎn)生耐藥性,嚴(yán)重?fù)p害人體健康,因此建立快速、高效、靈敏的氟喹諾酮類藥物多殘留檢測(cè)技術(shù)具有重要意義。本研究建立了同時(shí)檢測(cè)雞肉中洛美沙星、氧氟沙星、恩諾沙星、培氟沙星多殘留的基質(zhì)固相分散萃取法-高效毛細(xì)管電泳(HPCE)法及液相-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)驗(yàn)證方法,結(jié)果如下：

2、 1.高效毛細(xì)管電泳檢測(cè)FQs標(biāo)準(zhǔn)方法的建立實(shí)驗(yàn)通過正交試驗(yàn)對(duì)電泳緩沖液的離子濃度、緩沖液pH值、分離電壓和分離溫度等電泳條件進(jìn)行了考察,建立了同時(shí)分離檢測(cè)洛美沙星、氧氟沙星、恩諾沙星和培氟沙星等4種FQs的HPCE法。電泳緩沖溶液：35 mmol/L硼砂緩沖液(pH 8.8);電壓：22kV;溫度：25℃：進(jìn)樣壓力：0.8psi;進(jìn)樣時(shí)間：10s;內(nèi)徑75μm×60cm未涂層熔融石英毛細(xì)管柱,上述4種藥物在7分鐘內(nèi)達(dá)到基線分離

3、。4種藥物濃度在0.5～20μg/g時(shí)與其峰面積呈良好的線性關(guān)系。線性方程和相關(guān)系數(shù)為洛美沙星:C=2014.1S-104.47(R=0.9993)、氧氟沙星:C=3016S+61.316(R=0.9994)、恩諾沙星:C=1319.1S-122.69(R=0.9990)、培氟沙星:C=2696.1S-524.52(R=0.9996)。 2.雞肉中FQs樣品前處理方法的建立建立了3種樣品前處理方法：液-液萃取、固相萃取和基質(zhì)固相

4、分散萃取法,并對(duì)這3種方法進(jìn)行比較,優(yōu)化后的樣品前處理方法為基質(zhì)固相分散萃取法。液-液萃取法：氟喹諾酮類藥物不同的組織樣品處理中多采用有機(jī)溶劑和磷酸鹽提取目標(biāo)化合物。本實(shí)驗(yàn)考察了磷酸鹽緩沖液、乙腈、NaOH/乙腈和醋酸/乙腈對(duì)雞肉樣品中4種藥物的提取效果,結(jié)果表明,乙腈具有較強(qiáng)的蛋白沉淀效果,4種藥物的回收率為79.2％～107.07％,能夠滿足檢測(cè)要求。 3.雞肉中FQs多殘留的MSPD-HPCE檢測(cè)方法的建立利用優(yōu)化后的MS

5、PD-HPCE對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行檢測(cè),測(cè)得雞肉樣品中殘留濃度洛美沙星為1.219μg/g、氧氟沙星為1.045μg/g、恩諾沙星為0.961μg/g、培氟沙星為3.401μg/g。四種藥物的最低檢測(cè)限范圍為51μg/kg～100μg/kg。 4.LC-MS對(duì)MSPD-HPCE方法的驗(yàn)證液相色譜條件：色譜柱(2.1mmI.D×150mm),流動(dòng)相：0.1％甲酸溶液-乙腈,梯度洗脫,在0至7.0min內(nèi)乙腈體積分?jǐn)?shù)從20％線性增加到70

6、％并保持至10min,在10.1min時(shí)乙腈體積分?jǐn)?shù)改至20％并平衡10mim,流速0.2 mL/min,柱溫35℃,進(jìn)樣量2μL。質(zhì)譜條件：離子化模式:ESI(+);鞘氣；氮?dú)?流速：0.75 L/min;輔助氣：氮?dú)?流速：0.15 L/min;離子源噴射電壓：4.5kV;毛細(xì)管溫度：180℃；毛細(xì)管電壓：13 kV;碰撞氣：氮?dú)猓欢嗉?jí)全掃描質(zhì)譜。獲得了各化合物的二級(jí)質(zhì)譜信息,發(fā)現(xiàn)氟喹諾酮類化合物在正離子檢測(cè)方式下可生成脫CO2、脫