毛葡萄葉水提物對(duì)大鼠腦缺血再灌注的保護(hù)作用.pdf

1、目的：通過建立大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)局灶性腦缺血再灌注模型，探討毛葡萄葉水提物對(duì)大鼠腦缺血再灌注的保護(hù)作用及其可能作用機(jī)制，為進(jìn)一步研發(fā)毛葡萄的藥物作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：(1)實(shí)驗(yàn)分組及給藥：SD大鼠60只，♀♂各半，體重(250±20)g隨機(jī)分為六組即：正常組，對(duì)照組，陽性藥物尼莫地平組，毛葡萄大劑量組，毛葡萄中劑量組，毛葡萄小劑量組，每組大鼠10只

2、。分組后第二天各組大鼠灌胃給藥，毛葡萄大劑量組劑量(4g·kg-1·d-1)；毛葡萄中劑量組劑量(2g·kg-1·d-1)；毛葡萄小劑量組劑量(1g·kg-1·d-1)；尼莫地平組劑量(5mg·kg-1·d-1)，對(duì)照組和正常組大鼠灌等量生理鹽水；各組每日灌胃給藥1次。連續(xù)灌胃7天。 (2)大鼠腦缺血再灌注模型的制備：參照longa線栓法[1]建立大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(middle cerebral artery occlusio

3、n，MCAO)局灶性腦缺血再灌注模型。除正常組之外，各組于末次給藥后30min以用4％水合氯醛(1ml/100g)麻醉動(dòng)物，手術(shù)分離并暴露右側(cè)頸總動(dòng)脈及頸內(nèi)外動(dòng)脈，結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈近心端及頸外動(dòng)脈，在頸總動(dòng)脈近分叉處剪一小口，插入頭端光滑尼龍線(直徑0.23mm，18mm處作標(biāo)記)，插人長(zhǎng)度約18±0.5mm，結(jié)扎并固定線栓，缺血2h后拔掉線栓再灌注22h。再灌注22h后各組首先進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分，然后麻醉大鼠腹主動(dòng)脈取血4ml，取離心血

4、漿分別用LDH、MDA、NO檢測(cè)試劑盒檢測(cè)血漿LDH、MDA、NO含量變化。 將取出的腦從額極至枕葉作等距切成A,B,C,D,E五個(gè)冠狀腦片，每片厚度約為1.8mm，置于4％TTC液中37℃孵育染色30 min。染色后用4％多聚甲醛固定24h，用數(shù)碼相機(jī)拍照后用AutoCAD軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)腦缺血面積；用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)腦bcl-2、caspase-3的表達(dá)。 結(jié)論： 1.毛葡萄葉水提物對(duì)腦缺血再灌注引起的腦損傷有