杜氏鹽藻鞭毛蛋白質(zhì)組學(xué)分析和GAPDH基因及其調(diào)控區(qū)的克隆與功能鑒定.pdf

1、鄭州大學(xué)博士學(xué)位論文杜氏鹽藻鞭毛蛋白質(zhì)組學(xué)分析和GAPDH基因及其調(diào)控區(qū)的克隆與功能鑒定姓名：賈巖龍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：薛樂勛20081201鄭州大學(xué)2008年博士論文杜氏鹽藻鞭毛蛋白質(zhì)組學(xué)分析和GAPDH基因及其調(diào)控區(qū)的克隆與功能鑒定是人類纖毛相關(guān)缺陷或突變性疾病十分理想的研究模式。通過對(duì)模式生物進(jìn)行研究不僅可以幫助我們了解鞭毛／纖毛結(jié)構(gòu)功能與人類相關(guān)疾病的關(guān)系，而且可以闡明許多至關(guān)重要的生命過程，包括細(xì)胞分裂周期

2、、細(xì)胞凋亡和發(fā)育及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等。因此，為了解纖毛在發(fā)育和生理過程中的作用，很有必要對(duì)纖毛裝配和功能所必需的基因及其蛋白產(chǎn)物進(jìn)行研究和鑒定。杜氏鹽藻(Dunaliellasalina，Dsalina)是一種比較獨(dú)特的高度耐鹽單細(xì)胞真核綠藻：具雙鞭毛而能游動(dòng)，沒有細(xì)胞壁，含有一個(gè)較大的杯狀葉綠體能進(jìn)行光合作用；可在含有005M一5MNaCl的環(huán)境中生長(zhǎng)。極其耐鹽的抗逆性能力，簡(jiǎn)單的細(xì)胞結(jié)構(gòu)以及便利的培養(yǎng)條件使杜氏鹽藻成為重要模式生物和遺傳學(xué)研

3、究的良好材料。鹽藻細(xì)胞可利用其鞭毛進(jìn)行運(yùn)動(dòng)和交配期細(xì)胞間的識(shí)別。由于鹽藻鞭毛位于細(xì)胞的表面，所以易于分離并進(jìn)行生化和遺傳分析。所以，以鹽藻作為模式生物來研究真核細(xì)胞鞭毛的裝配和功能有如下獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)：(1)其單倍體基因組適于進(jìn)行表型遺傳分析；(2)應(yīng)用電轉(zhuǎn)法、粒子轟擊法(基因槍法)和玻璃珠法等轉(zhuǎn)化方法，其核及葉綠體基因組可進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化和表達(dá)分析；(3)突變體和分子標(biāo)記可用于相關(guān)基因的克隆鑒定。(4)在鹽藻中可以大量提取并純化鞭毛蛋白以進(jìn)行