利用SSR技術(shù)構(gòu)建甜瓜品種（系）核酸指紋圖譜.pdf

1、甜瓜(Cucumic melo L.)是蔓生草本植物，屬于葫蘆科(Cucurbitaceae)甜瓜屬（Cucumis）是水果型蔬菜，在中國乃至世界的園藝產(chǎn)業(yè)中都占有很重要的地位。我國甜瓜的種植總面積和產(chǎn)量都于居世界首位，反復(fù)利用具有優(yōu)良性狀的親本材料應(yīng)用到實際生產(chǎn)中，培育新品種，導(dǎo)致其基因資源更替的缺乏，并使甜瓜品種間遺傳差異性變得越來越小。傳統(tǒng)的評價基因多樣性進行鑒定都是基于其形態(tài)學(xué)表現(xiàn)性狀的描述，經(jīng)常受限于環(huán)境影響，很少能在同一時期

2、僅靠某一性狀同時區(qū)分大量的群體材料。因此想要鑒別大量不同甜瓜材料的差異性，僅靠形態(tài)學(xué)標(biāo)記會給品種資源的選育與保護、鑒定與篩選以及開發(fā)與管理等諸多環(huán)節(jié)帶來不同程度的阻礙，并且在經(jīng)營生產(chǎn)中還存在套購或盜繁他人育成品種，或換包裝改名稱充當(dāng)市場熱銷品種等不道德的現(xiàn)象，致使同物異名或者同名異物現(xiàn)象比比皆是。
　　為了解決上述種種矛盾，我們選擇了SSR指紋圖譜技術(shù)，這一方法是在分子水平上得出指紋圖譜代碼，然后再結(jié)合其形態(tài)學(xué)標(biāo)記從而達到準(zhǔn)確鑒定

3、的目的，賦予每份甜瓜品種一個能夠準(zhǔn)確表述其身份的“證件”。為甜瓜品種資源的DNA指紋圖譜數(shù)據(jù)采集提供了信息平臺，對于生產(chǎn)貿(mào)易中的品種權(quán)糾紛或是進行司法維權(quán)提供可靠的技術(shù)支撐，也為甜瓜品種資源的純度，種質(zhì)真實性鑒定及親緣關(guān)系等鑒定起到一定程度地奠定作用。
　　本試驗采用形態(tài)學(xué)標(biāo)記，對14個表型性狀的數(shù)據(jù)統(tǒng)計進行多樣性分析，其平均變異系數(shù)為0.32，果型指數(shù)的變異系數(shù)最大，為0.83。再結(jié)合18對甜瓜核心SSR引物對329份材料進行實

4、驗，得到清晰可辨的條帶共6383條，其中多態(tài)性條帶227條。PCR產(chǎn)物片段大小范圍在100-550 bp之間，得到的具有多態(tài)性的條帶數(shù)目不等，分布范圍在4-16條之間，平均條帶數(shù)為10條。其中有29個品種指紋代碼不具有唯一性，鑒別率能到達91％。利用相關(guān)的軟件對隨機抽取的五份甜瓜供試材料進行編碼，所包含信息如下:品種名稱、品種產(chǎn)地、該品種果皮底色、果肉顏色、肉質(zhì)、類型、糖含量等表型特征描述以及本實驗中利用SSR標(biāo)記技術(shù)所得出的分子DNA