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文檔簡介
1、中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文甘藍型油菜顯性核不育基因的AFLP標記及品種(系)的SSR指紋圖譜研究姓名:程勇申請學位級別:碩士專業(yè):作物遺傳育種指導教師:李云昌20050620AbstractRapeseedisoneofthemajoroilsecdcropsinChinaBreedersstillfacethecomlllOnandmaingoalofimprovingtheproductionlevelofrapeseedLieta
2、l(1985)hadproposedforthefirsttimethatthesterilityofdominantgeniemalesterility(GMS)followedadigenicmodeofinheritancewithepistaticinteraction,andestablishedtwolinesystemandthreelinesystemasGMSbreedingmodelsThishypothesisan
3、dmodelsmadeheterosisutilizationofGMStobeaprimarystrategyinBrassicanapusLbreedingThedominantGMSisanexcellentsysteminhybridbreedingforitsstableandcompletesterilityimpervioustoenvironment,vigomuslygrowthandeasytotransformst
4、erileandfertilegenesInthreelinesystem,homozygousGMStwotypelineisafoundationmaterialselectedfromhybridofrestorerandsterileplantofheterozygoustwotypelineTheselectiondependsonanalyzingofsegregationratebetweenfertileandsteri
5、lehybridsTomakethissystemawideruseitisnecessarytodevelopmolecularmakersofitssterilegenesandanalyzethediversityofparentallinestomakethemostoptimizeshybridsThepresentstudyincludes(1)breedingofahomozygousGMStwotypelinefrom且
6、napusheterozygoustwotypeline70056ABandarestorerline9548;(2)developingA砌(AmplifiedFragmentLengthPolymorphism)molecularmarkersofmalesterilitygenebasedOil70056ABsib—matingpopulationbyBSA(BulkedSegregantAnalysis)metIlod;(3)a
7、nalyzingtheSSRfmgefprintofparentallinesincludingrestorer9548inordertogainthegeneticdistancedataforbreedingpmgramMainresultsofthepresentstudiesareasfollowing:1ThegenotypeofrestorerlinewasidentifiedasmsmsR/瞬faftercrossedst
8、erileplantofheterozygonstwotype70056ABwithrestorer9548andinvestigatedthesterilityofF1,F(xiàn)2andF3populationsTheinvestigationresultsshowedthatF1plantswere100%fertile,F(xiàn)2populationsweretestedtofitthesegregationrateof1:1by。2test
9、andF3populationhadtheidealfertilitysegregationTheseresultswouldleadtosuccessfulselectionofhomozygousGMStwotypelineinthenearfuture2Fertilebulk(A)andsterilebulk@wereconstructedinthesib—matingpopulation70056AB(70056A70056B)
10、byBSAmethodandwereusedinthefoUowingoptimizationTheprotocolofAFLPmolecularmarkerapproachWasoptimizedinrestrictionendonucleasesdigestion,ligationanddilutionoftemplatesThetwo_stepmethod,ieseparatinlngthedigestionandligation
11、steps,WaseonfLrmedtobebetterforthedigestionactivityofrestrictionenzymesandresultinlegibleandrepeatablebandsThetemplatedilutionwasnotanimportantparameterintwostepmethodandhadlittleinfluencetoamplificationresultsWhereasino
12、nestepmethod,maindifferentialfragmentsappearedinthesamesampleonlywithdifferentdilutiongradesoftemplates,whichmisledtheprimerscreeningresultAnoptimizedAFLPprotocolwerethenconfirmedasfollowing:genomicDNAwereincubatedfor5hr
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