膿毒癥早期大鼠NPY、下丘腦-垂體-腎上腺軸的變化及血必凈對(duì)其的影響.pdf

1、目的：目前膿毒癥的病死率高達(dá)30％-50％，一旦并發(fā)休克和多器官衰竭，其病死率可達(dá)80％-90％。臨床流行病學(xué)資料顯示，膿毒癥是危重患者的主要死亡原因之一，現(xiàn)已成為進(jìn)一步提高危重癥救治成功率的最大障礙。然而迄今為止，膿毒癥時(shí)機(jī)體的炎癥反應(yīng)機(jī)制還沒有充分闡明，神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)理論的形成與出現(xiàn)為膿毒癥發(fā)病機(jī)制的進(jìn)一步認(rèn)識(shí)提供了契機(jī)。在神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)研究中，越來越多的研究證明作為神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)中神經(jīng)肽-Y(neuropept

2、ideY，NPY)發(fā)揮著非常重要的作用，有研究證明先天免疫和后天免疫中，NPY發(fā)揮著多效性的作用；下丘腦-垂體-腎上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal，HPA)axis軸作為應(yīng)激的中心環(huán)節(jié)同樣起著至關(guān)重要的作用，且HPA軸和NPY系統(tǒng)之間有著密切的聯(lián)系。深入研究NPY系統(tǒng)與HPA軸及兔疫系統(tǒng)之間的相互調(diào)節(jié)機(jī)制有望開辟膿毒癥臨床干預(yù)的新途徑。
　　 血必凈注射液的主要有效成分包括紅花黃色素A、川芎嗪、

3、丹參素、阿魏酸、芍藥苷、原兒茶醛。血必凈注射液能在體內(nèi)外有效拮抗內(nèi)毒素，抑制體內(nèi)多種炎性介質(zhì)的病理生理作用，恢復(fù)受到抑制的免疫反應(yīng)，對(duì)應(yīng)激性臟器損傷具有良好的保護(hù)和修復(fù)作用。
　　 本研究利用盲腸結(jié)扎穿孔(cecalligationandpuncture，CLP)法復(fù)制大鼠膿毒癥模型，探討膿毒癥早期大鼠血漿NPY與下丘腦組織促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasinghormone，CRH)，血漿促腎

4、上腺皮質(zhì)激素(adrenocorticotropichormone，ACTH)、皮質(zhì)酮(cortisol，CORT)水平的變化規(guī)律，同時(shí)探討血必凈注射液干預(yù)后上述指標(biāo)的變化，明確血必凈對(duì)膿毒癥早期大鼠血漿NPY與下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸的調(diào)節(jié)作用。
　　 方法：
　　 膿毒癥動(dòng)物模型的制備選用經(jīng)典的盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)法，并行頸動(dòng)脈脈置管以備采血。健康雄性Sprague-Dawley大鼠40只，隨機(jī)分為4組：空

5、白對(duì)照組(Normalgroup):不給予任何處理，直接處死；假手術(shù)組(Sham（XBJgroup）：制模后即刻經(jīng)尾靜脈注射血必凈4ml/kg。各組術(shù)后在腹部皮下注射生理鹽水30ml/kg，補(bǔ)充術(shù)中丟失量和生理需要量。除空白對(duì)照組外，各組均于術(shù)后6小時(shí)經(jīng)頸動(dòng)脈取血3ml，離心后取血漿于-80℃凍存，放射免疫法測定血漿中NPY、ACTH、CORT的水平；并迅速留取下丘腦組織凍于液氮中，放射免疫法批量測定下丘腦組織勻漿中CRH的水平。

6、>　　 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0版軟件包(SPSSCompany，Chicago，Illinois，USA)進(jìn)行；數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((?)±s)表示，各組均數(shù)的比較行單因素方差分析(ANOVA)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況的觀察：假手術(shù)組大鼠術(shù)后清醒較快，活動(dòng)靈活，自由飲水，剖腹未見腹水，無惡臭。氯化鈉組動(dòng)物術(shù)后蘇醒延遲，精神萎靡，活動(dòng)遲緩，精神較差，豎毛，呼吸

7、急促，剖腹可見淡血性腹水多，惡臭，腸管水腫，有的盲腸末端發(fā)黑。血必凈組動(dòng)物與氯化鈉組相比表現(xiàn)較輕。
　　 2各組大鼠血漿NPY含量的比較：氯化鈉組血漿NPY含量(5304.231±557.200pg/ml)明顯高于正常對(duì)照組（2226.968±179.429pg/ml,P＜0.01），假手術(shù)組（2693.453±98.455pg/ml,P＜0.05）及血必凈組血漿NPY含量（2769.779±386.879pg/ml，P＜0.0

8、5）。假手術(shù)組及血必凈組高于正常對(duì)照組(P＜0.05）：假手術(shù)照組與血必凈組之間相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　 3各組大鼠血漿CORT含量的比較：氯化鈉組血漿CORT含量(30.660±1.548ng/ml)明顯高于正常對(duì)照組（7.628±0.558ng/ml,P＜0.01）及假手術(shù)組（11.853±0.871ng/ml,P＜0.01）；血必凈組血漿CORT含量(22.131±1.458ng/ml)明顯低于氯化鈉組(P

9、＜0.01)；正常對(duì)照組與假手術(shù)組之間相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　 4各組大鼠血漿ACTH含量的比較：氯化鈉組血漿ACTH含量(26.260±1.634pg/ml)明顯高于正常對(duì)照組（8.841±1.393pg/ml,P＜0.01）及假手術(shù)組（11.429±0.469pg/ml,P＜0.01）；血必凈組血漿ACTH含量(26.260±1.634pg/ml)明顯低于氯化鈉組(P＜0.01)；正常對(duì)照組與假手術(shù)組血漿AC

10、TH含量相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　 5各組大鼠下丘腦組織CRH含量的比較：氯化鈉組下丘腦組織勻漿中CRH含量(101.923±6.610ng/ml)明顯高于正常對(duì)照組(61.653±6.051ng/ml,P＜0.05)和假手術(shù)組(66.653±4.035ng/ml,P＜0.05);血必凈組下丘腦組織CRH含量(84.091±2.541ng/ml)明顯低于氯化鈉組（P＜0.05）；正常對(duì)照組與假手術(shù)組下丘腦組織勻漿中