血必凈對(duì)膿毒癥大鼠凝血功能、腸微循環(huán)及腸道屏障的干預(yù).pdf

1、目的： 膿毒癥時(shí)，全身炎性反應(yīng)激活凝血系統(tǒng)，導(dǎo)致凝血功能障礙，微循環(huán)障礙，微血栓形成。本文應(yīng)用祖國(guó)傳統(tǒng)中藥制劑血必凈對(duì)膿毒癥大鼠凝血、腸微循環(huán)及腸屏障功能的干預(yù)，探討其對(duì)膿毒癥時(shí)上述病理改變的干預(yù)及預(yù)防效果。目的包括： 1．使用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)建立大鼠膿毒癥動(dòng)物模型[1]，觀察血必凈對(duì)膿毒癥大鼠全身炎性反應(yīng)和凝血功能障礙的干預(yù)效果。 2．在體實(shí)時(shí)觀察膿毒癥大鼠腸系膜微循環(huán)的改變，觀測(cè)血必凈對(duì)毛細(xì)血管血流動(dòng)力學(xué)改變和

2、微血栓形成的影響作用。 3．觀察膿毒癥時(shí)血必凈對(duì)腸道粘膜和免疫屏障功能異常的影響。 方法： 1．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為SD大鼠150只，雌雄不拘，隨機(jī)分為3組，即膿毒癥組(A組)、血必凈干預(yù)組(B組)和假手術(shù)組(C組)，每組50只。A組：行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)。C組：開(kāi)腹，暴露盲腸，不行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)。B組：處理同膿毒癥組，術(shù)后血必凈組大鼠腹腔內(nèi)給予血必凈注射液4ml/kg，1次/12h，共3d。其它兩組注射相同體積的生理鹽水。制

3、模后于即刻和使用血必凈后12h、24h、48h、72h進(jìn)行頸動(dòng)脈取血檢測(cè)炎性因子和凝血功能指標(biāo)然后將動(dòng)物活殺，每時(shí)間點(diǎn)有效活殺檢測(cè)的大鼠為10只。 2．在上述時(shí)間點(diǎn)取血前，取出回盲部附近的腸系膜，顯微鏡下觀察PMN在腸系膜毛細(xì)血管血流動(dòng)力學(xué)改變和微血栓形成情況并錄像。 3．在上述時(shí)間點(diǎn)取血后，快速取距盲腸約10cm小腸標(biāo)本一段，10％福爾馬林固定，送檢病理科，石蠟包埋后切片，光鏡下觀測(cè)腸粘膜病變。免疫組化法測(cè)腸粘膜巨噬細(xì)

4、胞抗體(Ed-1)。 結(jié)果： 1．對(duì)照組，凝血功能基本正常，同膿毒癥組、血必凈干預(yù)組相比，差異顯著。膿毒癥組大鼠，24h凝血功能出現(xiàn)異常，48h及72h維持高水平，較24h明顯升高；血必凈干預(yù)組，24h凝血功能出現(xiàn)異常，與膿毒癥組無(wú)明顯差異，48h達(dá)高峰，72h未再升高，與膿毒癥組有明顯差異； 2．對(duì)照組，TNF，IL-1，IL-6，IL-8，血清含量較低，同膿毒癥組、血必凈干預(yù)組相比，差異顯著。膿毒癥組大鼠，T

5、NF，IL-1，IL-6，IL-8，12h開(kāi)始升高，24h明顯升高，48h及72h維持高水平；血必凈干預(yù)組，TNF，IL-1，IL-6，IL-8，12h開(kāi)始升高，與膿毒癥組無(wú)明顯差異，48h達(dá)高峰，72h未再升高，與膿毒癥組差異顯著。 3．膿毒癥組大鼠，12h腸系膜微循環(huán)血流速度明顯加快，24h血流速度減緩，PMN附壁明顯增多，48h血流淤滯，流速進(jìn)一步減低，微血栓形成，72h變化不明顯，但血流速度加快。血必凈組大鼠，12h腸系

6、膜微循環(huán)血流速度明顯加快，24h血流速度減緩，但與12h相比無(wú)明顯差異，與膿毒癥組相比有明顯差異，PMN附壁增多不明顯，但與膿毒癥組相比有顯著差異，48h血流進(jìn)一步減緩，有微血栓形成，與膿毒癥組無(wú)明顯差異，72h變化不明顯，但血流速度加快，與膿毒癥組有差異。與對(duì)照組相比較，膿毒癥組、血必凈干預(yù)組在上述時(shí)間點(diǎn)的變化顯著。 4．膿毒癥組大鼠，12h腸道粘膜充血水腫，多為基本正常粘膜，即0，1級(jí)為主，24h2，3級(jí)為主，48h出現(xiàn)4，

7、5級(jí)病變；腸粘膜巨噬細(xì)胞抗體表達(dá)逐漸增多，24h達(dá)最高峰，48h開(kāi)始減少與24h相比較，有顯著差異，與72h有明顯差異。血必凈干預(yù)組，12h同膿毒癥組，24h多為1，2級(jí)病變，48h出現(xiàn)3，4級(jí)病變，偶可見(jiàn)5級(jí)病變，72h病變基本等同同組48h，但與膿毒癥組有差異；腸粘膜巨噬細(xì)胞抗體表達(dá)量較膿毒癥組增多明顯，48h與膿毒癥組有顯著差異。與對(duì)照組相比較，有顯著差異。 結(jié)論： 1．血必凈可在一定程度上抑制膿毒癥時(shí)炎性因子的激