引導電極對青霉素致癇大鼠mGluR7及GLT-1時程表達特征的影響研究.pdf

1、目的：通過觀察青霉素致癇大鼠代謝型谷氨酸受體7（mGluR7）及谷氨酸轉運體-1（GLT-1）在癇性發(fā)作三個時期表達的變化特征，以及引導電極置入前后對其的影響，論證“抑制屏障突破假說”。 方法：應用青霉素經大鼠海馬微注射制備急性癇性發(fā)作模型（注射點均為右側海馬），在相應模型組老鼠注藥點附近（注藥點后1mm）置入引導電極，引導電極一端置入腦組織，一端置入皮下。將42只Sprague-Dawley（SD）大鼠被隨機分為7組，每組6只

2、。分別為：生理鹽水對照組（A），青霉素驚厥前期組（B1），青霉素驚厥期組（B2），青霉素驚厥后期組（B3），引導電極驚厥前期組（C1），引導電極驚厥期組（C2），引導電極驚厥后期組（C3）。 記錄七組大鼠注藥后至癥狀發(fā)作的間隔時間，即潛伏期，對致癇后0h、1h、2h予以行為學評分，并記錄每組大鼠5分鐘的癇性發(fā)作次數(shù)，同時行腦電圖記錄。每組按要求時間點處死大鼠，取腦組織做石蠟切片，用免疫組化檢測mGluR7和GLT-1表達變化，所

3、得的陽性著色面積與切片總面積的百分比進行統(tǒng)計學分析。 結果 1.行為學變化 1.182組與B3組潛伏期約12.50±4.17分，C2組與C3組潛伏期約17.08±5.50分，時間長于B2組及B3組。 1.2青霉素組（B2組，B3組）大鼠，癇性發(fā)作在驚厥期0小時以2-3級為主，驚厥期1小時以4級為主，驚厥期2小時以4-5級為主；引導電極組（C2組，C3組）驚厥期0小時癇性發(fā)作以2級為主，驚厥期1小時以2-3

4、級為主，驚厥期2小時癇性發(fā)作以2-4級為主，4-5級癇性發(fā)作百分比較青霉素組（B2組，B3組）減少。 1.3在致癇后0小時、1小時、2小時三個時間點上，癇性發(fā)作次數(shù)隨著時間增加而增加；而C2組、C3組與B2組、B3組相應時間點比較，癇性發(fā)作次數(shù)無明顯異常。 2.腦電圖 對照組（A組）大鼠腦電波形頻率以α、β波為主，散在可見θ波；青霉素右側海馬局部注射后，驚厥前期腦電圖上逐漸出現(xiàn)多種形式的癇樣性腦電活動，主要是散在

5、的陣發(fā)性的尖波、棘波；在驚厥期2小時點，腦電圖表現(xiàn)為中到高波幅的、持續(xù)性的尖波、棘波、尖慢波、棘慢波，驚厥后期雖無行為學癇性發(fā)作，但腦電圖上仍可見低波幅的癇性放電；而引導電極組（C1-3組）可見引導電極干預后仍出現(xiàn)青霉素組類似腦電圖變化，但異常腦電活動的頻率和幅度均有所減低。 3.免疫組化結果 3.1海馬CA3區(qū)mGluR7蛋白：與A組比較，B1組、B2組、C1組及C2組表達增高； B3組、C3組表達無明顯差別；但C2組

6、與B2組比較，C2組表達減低；C1組與B1組及C3組與B3組比較，表達無明顯差別。 齒狀回mGluR7蛋白：與A組比較，B1組、B2組、C1組及C2組表達增多，B3組、C3組表達無明顯差別；C1組與B1組、C2組與B2組及C3組與B3組比較，表達無明顯差別。 3.2海馬CA3區(qū)GLT-1蛋白表達：與A組相比，B1組、B2組、C1組及C2組表達增高，B3組、C3組表達無明顯差別；C2組與B2組比較，C2組表達減低，C1組與

7、B1組、C3組與B3組比較，表達無明顯差別；齒狀回GLT-1蛋白：與A組比較，B1組、B2組及C1組表達增加，B3組、C2組及C3組表達無明顯差別；C1組與B1組比較，C1組表達減低，C2組與B2組、C3組與B3組比較，表達無明顯差別。 結論： 1.青霉素致癇時mGluR7及GLT-1表達呈現(xiàn)特征性變化，說明mGluR7及GLT-1參與青霉素致癇的過程。 2.mGluR7及GLT-1在驚厥前期及驚厥期表達增多，驚