引導(dǎo)電極對(duì)青霉素致癇大鼠mGluR7及GLT-1時(shí)程表達(dá)特征的影響研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀察青霉素致癇大鼠代謝型谷氨酸受體7（mGluR7）及谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1（GLT-1）在癇性發(fā)作三個(gè)時(shí)期表達(dá)的變化特征，以及引導(dǎo)電極置入前后對(duì)其的影響，論證“抑制屏障突破假說(shuō)”。 方法：應(yīng)用青霉素經(jīng)大鼠海馬微注射制備急性癇性發(fā)作模型（注射點(diǎn)均為右側(cè)海馬），在相應(yīng)模型組老鼠注藥點(diǎn)附近（注藥點(diǎn)后1mm）置入引導(dǎo)電極，引導(dǎo)電極一端置入腦組織，一端置入皮下。將42只Sprague-Dawley（SD）大鼠被隨機(jī)分為7組，每組6只

2、。分別為：生理鹽水對(duì)照組（A），青霉素驚厥前期組（B1），青霉素驚厥期組（B2），青霉素驚厥后期組（B3），引導(dǎo)電極驚厥前期組（C1），引導(dǎo)電極驚厥期組（C2），引導(dǎo)電極驚厥后期組（C3）。 記錄七組大鼠注藥后至癥狀發(fā)作的間隔時(shí)間，即潛伏期，對(duì)致癇后0h、1h、2h予以行為學(xué)評(píng)分，并記錄每組大鼠5分鐘的癇性發(fā)作次數(shù)，同時(shí)行腦電圖記錄。每組按要求時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，取腦組織做石蠟切片，用免疫組化檢測(cè)mGluR7和GLT-1表達(dá)變化，所

3、得的陽(yáng)性著色面積與切片總面積的百分比進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 1.行為學(xué)變化 1.182組與B3組潛伏期約12.50±4.17分，C2組與C3組潛伏期約17.08±5.50分，時(shí)間長(zhǎng)于B2組及B3組。 1.2青霉素組（B2組，B3組）大鼠，癇性發(fā)作在驚厥期0小時(shí)以2-3級(jí)為主，驚厥期1小時(shí)以4級(jí)為主，驚厥期2小時(shí)以4-5級(jí)為主；引導(dǎo)電極組（C2組，C3組）驚厥期0小時(shí)癇性發(fā)作以2級(jí)為主，驚厥期1小時(shí)以2-3

4、級(jí)為主，驚厥期2小時(shí)癇性發(fā)作以2-4級(jí)為主，4-5級(jí)癇性發(fā)作百分比較青霉素組（B2組，B3組）減少。 1.3在致癇后0小時(shí)、1小時(shí)、2小時(shí)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，癇性發(fā)作次數(shù)隨著時(shí)間增加而增加；而C2組、C3組與B2組、B3組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較，癇性發(fā)作次數(shù)無(wú)明顯異常。 2.腦電圖 對(duì)照組（A組）大鼠腦電波形頻率以α、β波為主，散在可見θ波；青霉素右側(cè)海馬局部注射后，驚厥前期腦電圖上逐漸出現(xiàn)多種形式的癇樣性腦電活動(dòng)，主要是散在

5、的陣發(fā)性的尖波、棘波；在驚厥期2小時(shí)點(diǎn)，腦電圖表現(xiàn)為中到高波幅的、持續(xù)性的尖波、棘波、尖慢波、棘慢波，驚厥后期雖無(wú)行為學(xué)癇性發(fā)作，但腦電圖上仍可見低波幅的癇性放電；而引導(dǎo)電極組（C1-3組）可見引導(dǎo)電極干預(yù)后仍出現(xiàn)青霉素組類似腦電圖變化，但異常腦電活動(dòng)的頻率和幅度均有所減低。 3.免疫組化結(jié)果 3.1海馬CA3區(qū)mGluR7蛋白：與A組比較，B1組、B2組、C1組及C2組表達(dá)增高； B3組、C3組表達(dá)無(wú)明顯差別；但C2組

6、與B2組比較，C2組表達(dá)減低；C1組與B1組及C3組與B3組比較，表達(dá)無(wú)明顯差別。 齒狀回mGluR7蛋白：與A組比較，B1組、B2組、C1組及C2組表達(dá)增多，B3組、C3組表達(dá)無(wú)明顯差別；C1組與B1組、C2組與B2組及C3組與B3組比較，表達(dá)無(wú)明顯差別。 3.2海馬CA3區(qū)GLT-1蛋白表達(dá)：與A組相比，B1組、B2組、C1組及C2組表達(dá)增高，B3組、C3組表達(dá)無(wú)明顯差別；C2組與B2組比較，C2組表達(dá)減低，C1組與

7、B1組、C3組與B3組比較，表達(dá)無(wú)明顯差別；齒狀回GLT-1蛋白：與A組比較，B1組、B2組及C1組表達(dá)增加，B3組、C2組及C3組表達(dá)無(wú)明顯差別；C1組與B1組比較，C1組表達(dá)減低，C2組與B2組、C3組與B3組比較，表達(dá)無(wú)明顯差別。 結(jié)論： 1.青霉素致癇時(shí)mGluR7及GLT-1表達(dá)呈現(xiàn)特征性變化，說(shuō)明mGluR7及GLT-1參與青霉素致癇的過(guò)程。 2.mGluR7及GLT-1在驚厥前期及驚厥期表達(dá)增多，驚