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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)采用青霉素致癇大鼠模型,通過(guò)檢測(cè)癲癇時(shí)腦組織內(nèi)超氧化歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和組織丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)的變化以及熱休克蛋白(heat shock protein,HSP)的表達(dá)變化,以探討銀杏葉提取物(Ginkgo biloba extract,GBE)對(duì)癲癇發(fā)作是否有保護(hù)作用。
方法:采用健康成年雄性Wistar大鼠48只,隨機(jī)分成兩組,分別用
2、于檢測(cè)SOD、MDA及HSP70表達(dá)的變化。每組為三個(gè)亞組:即正常對(duì)照組(生理鹽水組)、模型組(青霉素組)、藥物組(青霉素+銀杏葉組),每個(gè)亞組8只大鼠,藥物組于腹腔注射青霉素復(fù)制癲癇模型前給予藥物(銀杏葉提取物)灌胃干預(yù)1h,然后觀(guān)察癲癇大鼠的行為及腦電活動(dòng)的癇性發(fā)作潛伏期。于造模觀(guān)察1h后斷頭取大鼠海馬組織,應(yīng)用光電比較法測(cè)定SOD、MDA的含量,采用免疫組織化學(xué)法觀(guān)察HSP70表達(dá)的變化,并計(jì)算高倍鏡下免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞的HIS值。
3、
結(jié)果:1行為學(xué):造模前大鼠活動(dòng)靈活,飲食正常,反應(yīng)敏捷,皮毛純白光滑。腹腔注射青霉素后,動(dòng)物逐漸變得安靜,隨后出現(xiàn)眼神呆滯、呼吸加快,繼而出現(xiàn)點(diǎn)頭,頭部肌群抖動(dòng),或身體突然出現(xiàn)一下抽動(dòng)。模型組大鼠癇性發(fā)作潛伏期為38.45±3.05min,藥物組大鼠為56.62±2.42min,二者相比較后差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(0.05)。
2 SOD及MDA的檢測(cè)
2.1超氧化歧化酶(superoxide
4、dismutase,SOD)是生物體內(nèi)非常重要的氧自由基清除劑,組織內(nèi)SOD活性的高低可部分反映機(jī)體清除自由基的能力,氧自由基的大量生成消耗SOD,使SOD活性下降。對(duì)照組大鼠腦組織內(nèi)SOD含量為147.50±3.67 U/mg.prot,模型組大鼠為116.88±2.03U/mg.prot,藥物組大鼠為131.38±1.69U/mg.prot,三組兩兩比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.2組織丙二醛(maleic
5、 dialdehyde,MDA)水平能間接反映體內(nèi)氧自由基的代謝狀況以及組織受自由基損傷的程度。對(duì)照組大鼠腦組織內(nèi)MDA含量為1.42±0.04 nmol/mg.prot,模型組大鼠為2.43±0.13 nmol/mg.prot,藥物組大鼠為1.80±0.12 nmol/mg.prot,三組兩兩比較差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3 HSP70染色:HSP70陽(yáng)性細(xì)胞的胞漿呈棕黃色顆粒;陰性細(xì)胞由于蘇木精復(fù)染細(xì)胞核呈
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