成人急性淋巴細胞白血病ETV6基因重排分析及其臨床意義.pdf

1、背景：
　　 ETV6(又稱為TEL)基因是在各型白血病常見的受累雜合基因，可與多種伙伴基因形成融合基因并通過不同的機制參與白血病的發(fā)生。其中最常見的是由t(12;21)易位產(chǎn)生的ETV6/RUNX(1)(TEL/AML(1))融合基因，是兒章急性淋巴細胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)最常見的融合基因，是預后較好的指標并對化療敏感，但ETV6與成人ALL的發(fā)生、臨床特點及預后的關(guān)系尚不

2、明確。
　　 目的：
　　 本研究旨在研究成人ALL患者中ETV6基因易位及重排情況，探討ETV6基因重排與成人ALL發(fā)病及臨床預后之間的關(guān)系。
　　 方法：
　　 實驗組選擇初治或難治/復發(fā)的成人ALL患者32例（男:女=21∶11），中位年齡38(13-64)歲。疾病診斷和分型依據(jù)形態(tài)學、免疫學、細胞遺傳學(MIC)分型。對照組選取健康對照20例。取新鮮骨髓穿刺液為樣本，用信號分離熒光原位雜交(Spl

3、it-signal fluorescence in situ hybridization, Split-signal FISH)技術(shù)檢測實驗組及對照組ETV6基因重排情況。Split-signal FISH技術(shù)設計紅、綠兩種熒光探針分別標記目的基因斷裂位點的上、下游，如基因發(fā)生斷裂易位則表現(xiàn)為一對紅、綠熒光信號的分離。設計特異性引物對ETV6基因重排陽性的樣本行巢式反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(Reverse transcription-pol

4、ymerase chainreaction，RT-PCR)證實融合基因形成，并分析ETV6基因重排患者的臨床及預后特點。
　　 結(jié)果：
　　 ①32例成人ALL患者中，檢測到ETV6基因易位1例，陽性率3.13％。陰性對照組未檢測到ETV6異常熒光信號。
　　 ②針對ETV6-RUNX1融合基因設計引物進行巢式RT-PCR，產(chǎn)物經(jīng)1％瓊脂糖凝膠電泳得到ETV6-RUNX1目的條帶，證實了ETV6-RUNX1融合基

5、因形成。陰性對照組未檢測出ETV6-RUNX1轉(zhuǎn)錄本。
　　 ③ETV6-RUNX1融合基因陽性患者為男性34歲復發(fā)難治性急性淋巴細胞白血病(L2型，Pro-B ALL)，常規(guī)染色體核型(Conventional chromosome analysis，CCA)檢查結(jié)果為46XY，PCR法篩查融合基因結(jié)果為:BCR/ABL（-），MLL/AF4（-），MYC/IgH（-），PBX/E2A（-）?；颊咝蠽DLP方案誘導后達到第一次

6、緩解，經(jīng)4個月緩解期后復發(fā)，再次誘導治療失敗，于起病后9個月死亡。該患者起病時存在三個不良預后因素:年齡大，白細胞計數(shù)高及Pro-B ALL表型，復發(fā)后產(chǎn)生多種耐藥。
　　 結(jié)論：
　　 成人ALL ETV6-RUNX1融合基因陽性率低，臨床CCA檢測常得到假陰性結(jié)果;ETV6-RUNX1陽性與成人ALL的不良預后有關(guān)，尤其在與其他不良預后因素如起病時的年齡及白細胞計數(shù)高等同時存在時預后較差;FISH較之CCA能更敏感的