應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測口腔鱗癌頸淋巴結(jié)隱匿性轉(zhuǎn)移.pdf_第1頁
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1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測口腔鱗癌頸淋巴結(jié)隱匿性轉(zhuǎn)移姓名:張恩礁申請學位級別:碩士專業(yè):口腔臨床醫(yī)學指導教師:盧利20070301中文論著摘要應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測口腔鱗癌頸淋巴結(jié)隱匿性轉(zhuǎn)移目的應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測cNopNo口腔鱗癌頸淋巴結(jié)隱匿性轉(zhuǎn)移,并與半連續(xù)切片HE染色法比較,探討流式細胞術(shù)檢測淋巴結(jié)隱匿性轉(zhuǎn)移的方法學意義。并進行頸淋巴結(jié)隱匿性轉(zhuǎn)移率與腫瘤原發(fā)灶部位、病理分級、I臨床T分期三個臨床病理因素的相關(guān)性分析,探

2、討檢測頸淋巴結(jié)隱匿性轉(zhuǎn)移的臨床意義,并為進一步探討隱匿性轉(zhuǎn)移對于患者預(yù)后的影響做好準備工作,以期為臨床上制定口腔鱗癌患者的治療方案提供相關(guān)信息。材料與方法l、臨床資料與標本取術(shù)后常規(guī)病理檢查結(jié)果陰性的33例口腔鱗癌患者頸清掃術(shù)后44側(cè)頸淋巴結(jié)標本共470枚,一70℃冰箱保存,其中61枚較大淋巴結(jié)(最大直徑≥10cm)沿縱向剖開,一半行流式細胞術(shù)檢測,一半行間隔400um的半連續(xù)切片HE染色檢查。409枚較小淋巴結(jié)(最大直徑10cm)按區(qū)

3、進行流式細胞術(shù)檢測。2、流式細胞術(shù)網(wǎng)搓法將淋巴結(jié)標本制成單細胞懸液,以CKl4單克隆抗體進行間接免疫熒光染色(熒光素FITC標記二抗),標記淋巴結(jié)內(nèi)轉(zhuǎn)移的上皮成分,再聯(lián)合PI染色根據(jù)細胞周期分選細胞亞群,應(yīng)用流式細胞儀,通過前向角散射和側(cè)向角散射雙參數(shù),以矩形框和對角框選取有關(guān)細胞建立二維點圖。以非癌淋巴結(jié)標本的G0、Gl期細胞群設(shè)立橫縱坐標,將點圖分為四個象限。若標本在第二象限內(nèi)出現(xiàn)的細胞數(shù),即兩種熒光標記雙陽性的細胞數(shù)高于O1%,則

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