牛卵巢保存方法對卵母細胞體外成熟和體外發(fā)育的影響.pdf

1、本實驗針對該問題，以卵母細胞體外成熟效果和成熟卵母細胞的后續(xù)發(fā)育能力為主要衡量指標，研究了“生物保鮮劑”、溫度和儲存時間等因素對牛卵巢保存效果的影響，同時以體外成熟的卵母細胞為核受體開展了初步的牛體細胞核移植研究。實驗結(jié)果如下： 1.低溫4℃保存牛卵巢0h、3h、6h和8h，卵母細胞的成熟率分別為69.27％、67.95％67.25％和47.98％，孤雌激活后卵裂率分別為36.99％、31.76％、36.77％和16.61％，囊

2、胚率分別為14.16％、15.56％、14.43％和0％，低溫4℃保存0h、3h和6h三組卵母細胞的成熟率、孤雌激活后的卵裂率和囊胚率差異不顯著(P＞0.05)，而低溫4℃保存8h組卵母細胞的成熟率、卵裂率和囊胚率顯著低于其它三組(P＜0.01)； 2.低溫4℃添加生物保鮮劑保存牛卵巢0h、3h、6h和8h，卵母細胞的成熟率分別為71.67％、69.57％、68.22％和67.14％，孤雌激活后卵裂率分別為36.99％、33.4

3、7％、32.29％和31.10％，囊胚率分別為14.63％、16.43％、13.89％和13.53％，四組之間各項指標差異不顯著(P＞0.05)；低溫4℃添加生物保鮮劑保存牛卵巢8h組與低溫4℃保存牛卵巢8h組之間各項指標差異極顯著(P＜0.01)； 3.室溫(15-20℃)添加生物保鮮劑保存牛卵巢0h、3h、6h、8h，卵母細胞的成熟率分別為78.53％、71.32％，75.16％和77.98％，孤雌激活后胚胎卵裂率分別為38

4、.63％、36.19％，33.87％和33.17％，囊胚率分別為18.28％、17.56％，16.85％和17.43％，四組之間各項指標差異不顯著(P＞0.05)：室溫(15～20℃)添加生物保鮮劑保存牛卵巢8h組與低溫4℃添加生物保鮮劑保存牛卵8h組之間卵母細胞的成熟率差異顯著(0.05＜P＜0.01)，孤雌激活后卵裂率和囊胚率差異不顯著(P＞0.05)； 4.成熟培養(yǎng)液液中添加EGF0ng/ml、10ng/ml、30ng/m

5、l，卵母細胞的成熟率分別為64.86％、70.61％、72.27％，核移植胚胎激活后卵裂率分別為60.71％、80.61％、82.61％，囊胚率分別為11.88％、23.81％、25.00％.成熟培養(yǎng)液液中添加EGF10ng/ml組與30ng/ml組之間各項指標無明顯差異(P＞0.05)；與添加EGF0ng/ml組之間各項指標差異極顯著(P＜0.01)： 結(jié)果表明添加生物保鮮劑可以延長牛卵巢的保存時間；室溫(15-20℃)添加生