牛卵巢保存方法對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟和體外發(fā)育的影響.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)針對(duì)該問(wèn)題，以卵母細(xì)胞體外成熟效果和成熟卵母細(xì)胞的后續(xù)發(fā)育能力為主要衡量指標(biāo)，研究了“生物保鮮劑”、溫度和儲(chǔ)存時(shí)間等因素對(duì)牛卵巢保存效果的影響，同時(shí)以體外成熟的卵母細(xì)胞為核受體開展了初步的牛體細(xì)胞核移植研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1.低溫4℃保存牛卵巢0h、3h、6h和8h，卵母細(xì)胞的成熟率分別為69.27％、67.95％67.25％和47.98％，孤雌激活后卵裂率分別為36.99％、31.76％、36.77％和16.61％，囊

2、胚率分別為14.16％、15.56％、14.43％和0％，低溫4℃保存0h、3h和6h三組卵母細(xì)胞的成熟率、孤雌激活后的卵裂率和囊胚率差異不顯著(P＞0.05)，而低溫4℃保存8h組卵母細(xì)胞的成熟率、卵裂率和囊胚率顯著低于其它三組(P＜0.01)； 2.低溫4℃添加生物保鮮劑保存牛卵巢0h、3h、6h和8h，卵母細(xì)胞的成熟率分別為71.67％、69.57％、68.22％和67.14％，孤雌激活后卵裂率分別為36.99％、33.4

3、7％、32.29％和31.10％，囊胚率分別為14.63％、16.43％、13.89％和13.53％，四組之間各項(xiàng)指標(biāo)差異不顯著(P＞0.05)；低溫4℃添加生物保鮮劑保存牛卵巢8h組與低溫4℃保存牛卵巢8h組之間各項(xiàng)指標(biāo)差異極顯著(P＜0.01)； 3.室溫(15-20℃)添加生物保鮮劑保存牛卵巢0h、3h、6h、8h，卵母細(xì)胞的成熟率分別為78.53％、71.32％，75.16％和77.98％，孤雌激活后胚胎卵裂率分別為38

4、.63％、36.19％，33.87％和33.17％，囊胚率分別為18.28％、17.56％，16.85％和17.43％，四組之間各項(xiàng)指標(biāo)差異不顯著(P＞0.05)：室溫(15～20℃)添加生物保鮮劑保存牛卵巢8h組與低溫4℃添加生物保鮮劑保存牛卵8h組之間卵母細(xì)胞的成熟率差異顯著(0.05＜P＜0.01)，孤雌激活后卵裂率和囊胚率差異不顯著(P＞0.05)； 4.成熟培養(yǎng)液液中添加EGF0ng/ml、10ng/ml、30ng/m

5、l，卵母細(xì)胞的成熟率分別為64.86％、70.61％、72.27％，核移植胚胎激活后卵裂率分別為60.71％、80.61％、82.61％，囊胚率分別為11.88％、23.81％、25.00％.成熟培養(yǎng)液液中添加EGF10ng/ml組與30ng/ml組之間各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)明顯差異(P＞0.05)；與添加EGF0ng/ml組之間各項(xiàng)指標(biāo)差異極顯著(P＜0.01)： 結(jié)果表明添加生物保鮮劑可以延長(zhǎng)牛卵巢的保存時(shí)間；室溫(15-20℃)添加生