不同培養(yǎng)體系對牛卵母細胞體外成熟及克隆胚發(fā)育率的影響.pdf

1、本研究中，試驗一:探討了不同的因素對牛卵母細胞體外成熟的影響，目的是篩選出一套適合本實驗室條件下細胞核移植的卵母細胞體外培養(yǎng)成熟體系;試驗二:探討了不同的培養(yǎng)條件對牛核移植重構胚體外發(fā)育的影響，目的是優(yōu)化牛核移植重構胚的體外培養(yǎng)體系，進一步提高牛核移植重構胚的體外發(fā)育率和胚胎的質量。
　　 結果如下:
　　 1、試驗一:探討了卵泡直徑(2-4mm、4-6mm、6-8mm、＞8mm)、成熟培養(yǎng)時間、卵巢性周期以及卵丘細胞對

2、牛卵母細胞體外成熟的影響。結果表明:2mm≤D≤8mm的卵泡中的卵母細胞成熟率明顯高于8mm＜D卵泡中的卵母細胞的成熟率(P＜0.05)。將隨機分成三組的卵母細胞分別培養(yǎng)18h（Ⅰ組）、22h（Ⅱ組）和24h（Ⅲ組），Ⅰ組成熟率(68.2％)顯著低于Ⅱ組(78％)和Ⅲ組(81.8％)(P＜0.05)。采集卵泡期卵巢中的卵母細胞進行體外成熟培養(yǎng)，卵母細胞的體外成熟率(81.7％)要明顯高于黃體期卵巢中卵母細胞的體外成熟率(70.6％)(P

3、＜0.05)。卵丘—卵母細胞復合體(COCs)的質量影響卵母細胞的體外成熟，A、B、C三級卵母細胞成熟率分別是87.3％、76.2％、29.2％，AB之間差異顯著(P＜0.05)，均與C差異極顯著(P＜0.01)。
　　 2、試驗二:探討了不同的培養(yǎng)條件對牛核移植重構胚體外發(fā)育的影響。分為4個小試驗。試驗Ⅰ:探討谷光甘肽對牛核移植重構胚體外發(fā)育能力的影響，試驗組A中添加1mM谷胱甘肽，核移植重構胚在體外培養(yǎng)7d，核移植重構胚的桑

4、葚胚率(17.0％)、囊胚率(8.5％)明顯的提高與對照組(1.3％、1.3％)差異顯著(p＜0.05);試驗Ⅱ:探討低氧氣濃度(5％)對牛核移植重構胚體外發(fā)育能力的影響，核移植重構胚在體外培養(yǎng)7d，試驗組A0-3d核移植重構胚采用低氧氣濃度(5％)條件培養(yǎng)，桑葚胚率(11.8％)、囊胚率(7.8％)明顯的提高與對照組(1.3％、1.3％)差異顯著(p＜0.05);試驗Ⅲ:探討不同的供體細胞對牛核移植重構胚體外發(fā)育的影響，核移植重構胚在