不同成熟因素對延邊黃牛卵母細胞體外成熟及核移植后胚胎早期發(fā)育的影響.pdf

1、本實驗將屠宰后延邊黃牛的卵巢取回，用抽吸法回收卵母細胞，在不同條件下進行卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)，然后對成熟卵母細胞進行核移植、融合、激活以及胚胎的體外培養(yǎng)。實驗分別比較了在不同季節(jié)、不同的卵巢保存溫度、不同的操作時間、成熟培養(yǎng)時間以及有無黃體和卵泡直徑大小對牛卵母細胞體外成熟率、卵裂率、4-6C發(fā)育率和8-16C發(fā)育率的影響。得出的實驗結(jié)果如下： 1、分別在四個季度進行實驗，我們可以看出：秋季的成熟率、卵裂率、及4-6C發(fā)育率均

2、最高，與其它組之間存在顯著差異。所以秋季的實驗效果最好，是適宜延邊黃牛體細胞克隆的最佳季節(jié)。 2、卵巢保存溫度為20-29℃組的成熟率為．47.25％，卵裂率為40.82％；30-39℃組的成熟率為46.60％，卵裂率為44.63％；4-6C發(fā)育率分別是37.04％和45.00％。各項數(shù)據(jù)在兩組間的差異均不顯著。結(jié)果表明：運輸時間在6h以內(nèi)時，20-39℃間的卵巢保存溫度對牛卵母細胞體外成熟率和核移植后早期胚胎發(fā)育率不存在顯著差

3、異。 3、在實驗三中我們將操作時間分為1h、2h、3h。其中，操作2h組的成熟率最高，為74.45％，顯著高于1h(62.95％)組；三組的卵裂率分別是55.87％、55.16％和49.84％；4-6C發(fā)育率為42.86％、41.46％、35.85％；8-16C發(fā)育率分別是30.25％、24.39％和23.90％。三個處理組之間都沒有顯著差異。說明3h的操作時間可能對卵母細胞產(chǎn)生了不良影響，不利于牛卵母細胞的體外成熟，所以實驗操

4、作應(yīng)盡量在2h內(nèi)完成。 4、將成熟時間分成18-20h、20-22h和22-24h三個時間段，三組的成熟率分別為69.33％、77.35％和81.52％，其中18-20h的成熟率最低，22.24h的成熟率最高；卵裂率與成熟率相反，最高的是18.20h組，53.38％，最低的是22.24h組，49.07％，差異均不顯著；4-6C發(fā)育率為42.25％、43.64％、37.74％：8-16C發(fā)育率為16.90％、18.18％和26.4

5、2％，三組間都不存在差異。說明18-24h的成熟時間對牛卵母細胞體外成熟和核移植后早期胚胎發(fā)育的影響不大。 5、根據(jù)卵巢表面的黃體將實驗分為有黃體組(+)和無黃體組(-)。兩組的成熟率為60.63％和62.75％，4-6C發(fā)育率為34.41％和37.23％，8-16C發(fā)育率為26.89％、17.52％，不存在顯著差異；無黃體組的卵裂率(80.12％)高于有黃體組(58.86％)，但沒有顯著差異。結(jié)果表明卵巢表面有無黃體對延邊黃牛

6、卵母細胞的體外成熟和核移植后胚胎的早期發(fā)育沒有顯著影響。 6、根據(jù)卵巢表面卵泡的直徑將實驗分成三組：小于4mm組，4-6mm組和大于6mm組。三組的成熟率分別是60.74％、59.34％、69.17％，卵裂率為62.42％、71.11％、49.06％，4-6C發(fā)育率為36.56％、57.81％和53.85％，8-16C發(fā)育率為20.43％、21.88％和23.08％，各組數(shù)據(jù)間都沒有顯著差異，結(jié)果表明：卵泡直徑對延邊黃牛卵母細胞