激素對(duì)牛卵母細(xì)胞體外成熟及重組胚發(fā)育的影響.pdf

1、激素在卵母細(xì)胞的體外成熟培養(yǎng)中是一種經(jīng)常用的成分，雖然在試驗(yàn)中常有人在使用，但并沒(méi)有人系統(tǒng)的就激素的種類，使用的劑量等研究過(guò)對(duì)卵母細(xì)胞的體外成熟培養(yǎng)的影響。本實(shí)驗(yàn)主要研究促卵泡刺激素（FSH）、促黃體生成素（LH）、雌二醇（E2）、孕馬血清促性腺激素（PMSG）和人絨毛膜促性腺激素（HCG）對(duì)延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及重組胚發(fā)育的影響，從而提高延邊黃牛體細(xì)胞克隆的效率。利用屠宰后牛卵巢，用抽吸法回收卵母細(xì)胞，然后在不同種類、濃度激素條件

2、下進(jìn)行卵母細(xì)胞的體外成熟培養(yǎng)，最后將成熟的卵母細(xì)胞經(jīng)核移植所構(gòu)成的重組胚進(jìn)行體外培養(yǎng)。得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　1.在成熟液中添加不同濃度的FSH對(duì)延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆效率的影響的試驗(yàn)中，添加10μg/mL一組在卵母細(xì)胞成熟率、重組胚的卵裂率及囊胚發(fā)育率方面均顯著高于其它濃度組（P<0.05），所以確定10μg/mL是單獨(dú)使用FSH時(shí)最適合于延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆的最佳濃度。2.在成熟液中添加不同濃度

3、的LH對(duì)延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆效率的影響的試驗(yàn)中，添加30μg/mL組在卵母細(xì)胞成熟率、重組胚的囊胚發(fā)育率方面均顯著高于其它濃度組（P<0.05），所以確定30μg/mL是單獨(dú)使用LH時(shí)最適合于延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆的最佳濃度。
　　3.在成熟液中添加不同濃度的E2對(duì)延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆效率的影響的試驗(yàn)中，添加1.5μg/mL組的各個(gè)指標(biāo)均優(yōu)于其他濃度組，但差異不顯著（P>0.05），所

4、以確定1.5μg/mL是單獨(dú)使用 E2時(shí)最適合于延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆的最佳濃度。
　　4.在成熟液中同時(shí)添加 FSH、LH、E2對(duì)延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆效率的影響的試驗(yàn)中，同時(shí)添加共同作用組無(wú)論在卵母細(xì)胞成熟率，重組胚的卵裂率還是囊胚發(fā)育率都顯著高于單獨(dú)使用一種激素的效果（P<0.05）。5.在成熟液中添加不同濃度的PMSG對(duì)延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆效率的影響的實(shí)驗(yàn)中，添加10 IU/mL

5、組在卵母細(xì)胞成熟率、8-16細(xì)胞率及囊胚發(fā)育率都好于其它各組，但差異不顯著（P>0.05），所以確定10 IU/mL是單獨(dú)使用 PMSG時(shí)最適合于延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆的最佳濃度。
　　6.在成熟液中添加不同濃度的HCG對(duì)延邊黃牛卵母細(xì)胞體外成熟及體細(xì)胞克隆效率的影響的試驗(yàn)中，添加15 IU/mL組在卵母細(xì)胞成熟率、8-16細(xì)胞率及囊胚發(fā)育率方面都好于其它各組，但差異不顯著（P>0.05），所以確定15 IU/mL是