牛卵母細(xì)胞體外成熟與體外受精的研究.pdf

1、本試驗(yàn)重點(diǎn)研究影響牛卵母細(xì)胞體外成熟的因素，研究結(jié)果如下： 1、將屠宰場(chǎng)采集卵巢的保存溫度與保存時(shí)間分為二組：20～22℃(8～10h)，28～32℃(3～4h)。結(jié)果表明，20～22℃(8～10h)組的第一極體可見率(81.4％)、卵裂率(56.1％)和桑/囊胚率(20.8％)與28～32℃(3～4h)組(82.1％，56.7％，21.9％)之間差異均不顯著(P＞0.05)。結(jié)果表明，在卵巢保存溫度相對(duì)較低的情況下可以保存相對(duì)

2、較長(zhǎng)的時(shí)間而不影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力。 2、在成熟培養(yǎng)液中添加10％或20％BFF，培養(yǎng)的牛卵母細(xì)胞桑/囊胚發(fā)育率(29.9％，28.8％)明顯，高于添加5％BFF組或沒有添加組的桑/囊胚率(22.1％，19.9％，P＜0.05)。從而篩選出添加10％BFF有利于牛卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)。 3、在成熟培養(yǎng)液中添加50ng/mlEGF，卵母細(xì)胞的第一極體可見率(88.3％)、卵裂率(64.3％)和桑/囊胚發(fā)育率(25.0％)

3、均顯著高于不添加組(80.0％，57.8％，20.0％，P＜0.05)。結(jié)果表明，添加50ng/mlEGF有利于牛卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)。 4、在成熟培養(yǎng)液中聯(lián)合添加卵母細(xì)胞核成熟抑制劑dbcAMP、dbcAMP+HX和dbcAMP+IBMX抑制性培養(yǎng)6h后解除抑制，再常規(guī)培養(yǎng)18h，以dbcAMP+HX組卵母細(xì)胞的第一極體可見率(83.3％)、卵裂率(57.4％)和桑/囊胚發(fā)育率(22.8％)為高，但與對(duì)照組(81.6％，55.