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1、目的:通過觀察犬膽管損傷早期應(yīng)用丹參后組織的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、肉芽組織增生情況,以及膽管修復(fù)過程中與成纖維細(xì)胞增殖、膠原活動(dòng)密切相關(guān)的平滑肌肌動(dòng)蛋白(a-SmoothMuscleActin,a-SMA)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(Transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)表達(dá)的強(qiáng)度在不同時(shí)期變化,探討丹參在預(yù)防膽道損傷后狹窄的應(yīng)用價(jià)值。方法:選本地健康雜交犬66條,隨機(jī)分為正常對(duì)照(n=6)、損傷模型組(n=30)、實(shí)驗(yàn)
2、組(n=30)。建立動(dòng)物模型:正常對(duì)照組將正常健康犬直接捕殺后取出正常膽管;損傷模型組是將犬制造膽管損傷模型后正常飼養(yǎng);實(shí)驗(yàn)組是在制造膽管損傷模型術(shù)中和術(shù)后應(yīng)用參丹。兩組分別于術(shù)后3d、1wk、2wk、1mo、3mo各時(shí)間點(diǎn)將各組內(nèi)犬隨機(jī)處死6條,取出膽管標(biāo)本。標(biāo)本用10%甲醛溶液固定,常規(guī)處理后石蠟包埋,組織切片。HE染色,光鏡下觀察3組標(biāo)本的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及肉芽組織增生情況;用免疫組化SP法(streptavidin-perosida
3、se法)檢測(cè)a-SMA與TGF-β1的表達(dá)強(qiáng)度。結(jié)果:正常對(duì)照組未見炎癥反應(yīng)及肉芽組織增生現(xiàn)象。在術(shù)后早期(<2wk);實(shí)驗(yàn)組見大量淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞浸潤(rùn),組織壞死不明顯;損傷模型組見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)以中性粒細(xì)胞、嗜酸性白細(xì)胞為主,有少許淋巴細(xì)胞,壞死程度明顯,實(shí)驗(yàn)組與損傷模型組比較在炎癥細(xì)胞數(shù)量和壞死程度方面有顯著性差異(P<0.05);實(shí)驗(yàn)組毛細(xì)血管增生較明顯且與損傷模型組間有顯著性差異(P<0.05)。a-SMA、TGF-β1在正常對(duì)
4、照組中少量表達(dá),在實(shí)驗(yàn)組和損傷模型組術(shù)后各時(shí)期均強(qiáng)于正常對(duì)照組,均有顯著性差異(P<0.05)。且實(shí)驗(yàn)組早期強(qiáng)于損傷模型組(P<0.05),后期(>2wk)弱于損傷模型組(P<0.05)。結(jié)論:膽管損傷后3d~3mo,膽管的修復(fù)是在生成因子a-SMA、TGF-β1的干預(yù)、誘導(dǎo)、調(diào)節(jié)、促進(jìn)等生物效應(yīng)作用下完成的。丹參在膽管損傷的早期可增強(qiáng)創(chuàng)傷組織的炎癥反應(yīng),可促進(jìn)毛細(xì)血管生成、肉芽組織的形成,表現(xiàn)出免疫調(diào)節(jié)作用,并有促進(jìn)a-SMA及TGF
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