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1、目的:本研究通過對比檢測組織蛋白酶K(Cath-K)在正常和退變?nèi)俗甸g盤中的表達(dá),進(jìn)一步探討Cath-K在人椎間盤生理和病理條件下細(xì)胞外基質(zhì)改變的關(guān)系,并探討Cath-K與椎間盤退變的相關(guān)性,為椎間盤退變機(jī)理的研究及延緩和治療椎間盤退變提供理論依據(jù)。 方法:用免疫組化S-P法和ISA法對30例腰椎間盤突出癥患者椎間盤組織中Cath-K進(jìn)行檢測,并取脊柱骨折手術(shù)病人標(biāo)本7例和新鮮尸檢標(biāo)本8例正常椎間盤組織共15例作對照。實驗所用椎
2、間盤標(biāo)本取自術(shù)中(2006年3月至2007年4月在新疆石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院骨一科脊柱手術(shù)治療的患者)及新鮮尸體。退變組取白腰椎間盤突出癥行MED術(shù)患者,正常組取自無椎間盤突出癥的脊柱骨折手術(shù)自愿捐獻(xiàn)患者和尸檢椎間盤標(biāo)本,術(shù)中所取標(biāo)本經(jīng)MRI T2加權(quán)信號改變和術(shù)后病理檢驗,尸檢標(biāo)本經(jīng)病理檢查驗證所取標(biāo)本的可靠性。每一例標(biāo)本常規(guī)HE染色后進(jìn)行病理診斷,將已制成4μm切片標(biāo)本應(yīng)用免疫組化鏈霉素親生物素-過氧化物酶法(S-P法)對切片分別進(jìn)行抗C
3、ath-K單克隆抗體染色,顯微鏡下觀察顯色情況,隨機(jī)選取5個高倍視野,以Cath-K在胞漿被染成棕黃色為陽性,計數(shù)陽性細(xì)胞百分率和觀察染色強(qiáng)度,以二者乘積得分作為陽性強(qiáng)度判斷依據(jù),進(jìn)行陽性強(qiáng)度判斷,行陽性率統(tǒng)計并行統(tǒng)計學(xué)處理。組織勻漿中Cath-K行Elisa法測定后進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。 結(jié)果:免疫組化染色顯示,Cath-K染色定位于細(xì)胞漿。在實驗組中,多數(shù)標(biāo)本Cath-K陽性細(xì)胞較多,陽性率>90%:在對照組中,Cath-K陽性細(xì)
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