陳化烤煙葉面優(yōu)勢菌種的篩選定位與增香效應(yīng)研究.pdf

1、本文以3個(gè)烤煙品種為試材，采用微生物學(xué)、酶學(xué)和分子生物學(xué)等技術(shù)和手段對(duì)不同陳化時(shí)期煙葉的酶活性和葉面細(xì)菌的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行了研究。采用PCR-DGGE技術(shù)對(duì)不同陳化階段煙葉表面的微生物進(jìn)行了多樣性分析，對(duì)煙葉表面共有優(yōu)勢微生物菌株進(jìn)行了鑒定，并利用平板分離技術(shù)分離得到煙葉表面可培養(yǎng)優(yōu)勢微生物；通過向烤煙煙葉表面噴施酶制劑和優(yōu)勢細(xì)菌微生物來研究酶和微生物對(duì)煙葉中揮發(fā)性香氣成分含量的影響，研究結(jié)果如下： 1.不同陳化時(shí)期烤煙煙葉中幾種酶

2、活性的動(dòng)態(tài)變化。結(jié)果顯示，在不同陳化階段，煙葉中多酚氧化酶、過氧化物酶、淀粉酶、蛋白酶酶活性的變化規(guī)律基本一致，表現(xiàn)為在煙葉陳化初期，4種酶的酶活性呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢，到陳化6個(gè)月或者9個(gè)月時(shí)酶活性達(dá)到最大值，之后酶活性逐漸降低。不同品種之間，陳化煙葉中4種酶活性的變化規(guī)律是一致的，表明陳化過程中酶活性變化與煙草基因型關(guān)系不大。 2.不同陳化時(shí)期烤煙煙葉表面優(yōu)勢細(xì)菌微生物的分離鑒定。采用PCR-DGGE技術(shù)對(duì)不同陳化時(shí)期煙葉表面

3、優(yōu)勢細(xì)菌微生物進(jìn)行了分離鑒定，結(jié)果表明，在不同陳化時(shí)期，相同品種煙葉表面微生物的多樣性存在一定差異，隨著陳化時(shí)間的延長，煙葉表面的部分細(xì)菌微生物數(shù)量呈現(xiàn)增多趨勢，部分細(xì)菌微生物呈減少態(tài)勢，從總量來看，細(xì)菌微生物數(shù)量隨著陳化時(shí)間的延長逐漸降低，同一品種煙葉在不同陳化時(shí)期擁有較多共有的優(yōu)勢條帶；不同品種間條帶的差異程度較大，但不同品種煙葉表面也存在較多共有優(yōu)勢菌群，經(jīng)過測序分析，不同陳化時(shí)期不同品種煙葉表面上共有的優(yōu)勢菌種分別為Bacter

4、iovoraxsp.EPC3、Bacillusmegaterium、UnculturedSphingomonassp、Unculturedbacterium、Unculturedyard-trimming-compostbacteriumcloneS-12。同時(shí)采用平板分離方法對(duì)煙葉表面的可培養(yǎng)菌種進(jìn)行了分離鑒定，結(jié)果表明，在煙葉表面存在的優(yōu)勢菌種均為芽孢桿菌，他們分別是巨大芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、蕈狀芽孢桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌、堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿