再造煙葉循環(huán)白水中細菌種類與生長規(guī)律的研究.pdf

1、再造煙葉（Reconstituted Tobacco）又稱煙草薄片，是由煙梗和煙末等卷煙廢料使用造紙工藝制成性狀上接近甚至更優(yōu)于天然煙葉的薄片。在變廢為寶的同時，再造煙葉中的對人有害的成分（如焦油，煙堿，含糖量，燃燒值等）容易受人工控制，同時更方便添加香料物質以賦予再造煙葉香氣與風格。將再造煙葉回用于卷煙中，彌補了天然煙葉不易被改性的弊端，是控制和提高卷煙質量的一大途徑。但是目前再造煙葉生產企業(yè)水耗較大，并且排放的廢水中富含營養(yǎng)物質、煙

2、草有害成分和微生物，污水處理難度大、成本高。本研究對國內五家再造煙葉生產企業(yè)進行了調研，發(fā)現(xiàn)白水使用周期為3~7天，使用后期白水逐漸發(fā)酸發(fā)臭、多粘性物質聚集、紙機出現(xiàn)斷紙、生產效能降低，產品的感官品質下降。因為隨著白水循環(huán)，白水中的營養(yǎng)物質得到富集，造成微生物大量滋長，污染生產線。為了降低水耗、清潔生產、穩(wěn)定產品質量和改善生產環(huán)境，需要對白水中的細菌數(shù)量、變化規(guī)律和種類進行研究。
　　本研究主要內容包括：⑴分別使用食品行業(yè)中的國家

3、標準檢測方法平板菌落法和國家標準海洋規(guī)范調查規(guī)范中的吖啶橙染色直接計數(shù)法，對白水腐敗過程中的細菌進行檢測，發(fā)現(xiàn)僅能檢測活菌的菌落法的檢測結果無法被用來表征白水質量，需要尋找一種能夠同時檢測到活菌和衰亡細菌的檢測方法。經過文獻調研后結合生產需求和檢測成本，對濁度法、重量法、美蘭染色直接計數(shù)法和吖啶橙染色直接計數(shù)法四種快速檢測方法進行對比，發(fā)現(xiàn)濁度法、重量法和美蘭染色直接計數(shù)法受白水中細小纖維和懸浮顆粒的影響較大，不適用于白水中細菌的檢測。

4、對白水中除細菌外的物質進行吖啶橙染色觀察，發(fā)現(xiàn)吖啶橙染色直接計數(shù)法不受白水中干擾物質的影響。該研究對吖啶橙染色直接計數(shù)法的操作方法進行優(yōu)化。確定甲醛固定2 min，吖啶橙染色15 min的檢測方式。與國內五家再造煙葉生產企業(yè)共同試驗該方法，分析了該方法的重復率，重現(xiàn)性和精密度，結果顯示該方法能夠滿足分析學的要求，有可推廣性，具備成為國家行業(yè)標準的潛質。確定該方法為白水中細菌的檢測方法。⑵使用吖啶橙染色直接計數(shù)法對許昌薄片公司技術改進前的

5、白水中細菌總數(shù)變化規(guī)律進行了研究，發(fā)現(xiàn)生產初期白水中細菌總數(shù)快速增長，25 h左右達到峰值，連續(xù)生產36 h后白水中細菌總數(shù)達到動態(tài)平衡。在湖北薄片公司和上海薄片公司進行平行實驗，發(fā)現(xiàn)白水中細菌總數(shù)變化趨勢與許昌薄片公司實驗結果一致。分析研究了細菌變化規(guī)律，結合生產實際對該規(guī)律進行了解釋和探討，為白水中細菌防范措施提供了理論支持。2015年后半年許昌薄片公司在技術改進中增加了離心和絮凝等工藝，再次對許昌薄片公司中的白水中細菌進行檢測，發(fā)

6、現(xiàn)細菌峰值降低了52.2％，出峰時間由25 h延長到40 h，白水使用周期由以前的3~5天延長到目前的10天以上。⑶對白水中的所有細菌進行革蘭氏染色，發(fā)現(xiàn)白水中的細菌以革蘭氏陽性菌為主。對白水中細菌進行分離鑒定，共分離出4株優(yōu)勢菌株，發(fā)現(xiàn)四種細菌均為革蘭氏陽性菌，形狀以桿狀為主。通過16s rDNA序列分析發(fā)現(xiàn)四種細菌分別為：枯草芽孢桿菌（51.2%）、地衣芽孢桿菌（占18.5%）、蠟樣芽孢桿菌（0.7%）和黃桿菌（29.6%）。白水細