幽門(mén)螺桿菌對(duì)膽管癌細(xì)胞增殖與凋亡及細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討幽門(mén)螺桿菌(Hp)對(duì)人類膽管癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響，以及該影響的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。 方法：用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法和流式細(xì)胞儀法檢測(cè)Hp對(duì)膽管癌細(xì)胞增殖，凋亡及細(xì)胞周期分布情況的影響，利用免疫細(xì)胞化學(xué)和凝膠電泳遷移率變動(dòng)實(shí)驗(yàn)(EMSA)分析細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB在Hp作用前后的表達(dá)活化情況。再使用特異性NF-κB阻斷劑吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)，阻斷NF-κB的活化，利用細(xì)胞免

2、疫化學(xué)技術(shù)和RT-PCR半定量技術(shù)分析比較抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL在轉(zhuǎn)錄因子NF-κB失活前后的表達(dá)情況。 結(jié)果：在MOI值(細(xì)菌與細(xì)胞濃度比)為0.5:1的狀態(tài)下，Hp對(duì)QBC939細(xì)胞有促增殖作用，第1，3天的增殖率分別為15.24％±4.2％、34.18％±2.6％，t檢驗(yàn)P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在該MOI值時(shí)無(wú)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用，但可推動(dòng)細(xì)胞周期的進(jìn)展；在此過(guò)程中伴有細(xì)胞NF-κB活化和抗凋亡蛋白Bcl-2