雞痘病毒地方分離株的鑒定及致病性研究.pdf

1、雞痘是危害養(yǎng)雞業(yè)發(fā)展的一種重要傳染病，發(fā)病后成雞一般不造成死亡，雛雞死亡率較高，5％-30％不等，黏膜型雞痘癥狀較嚴(yán)重，有時(shí)可引起較高的死亡率。雞痘可使病禽生長遲緩，產(chǎn)蛋下降，種禽發(fā)病時(shí)孵化率降低，若并發(fā)其他傳染病、寄生蟲病和衛(wèi)生條件、營養(yǎng)狀況不良時(shí)也可引起大批死亡，死亡率甚至高達(dá)40％6～50％。 目前，世界各國對雞痘的預(yù)防主要是接種雞痘或鴿痘病毒弱毒活疫苗，在很大程度上降低了雞痘的發(fā)生率。但近些年來，雞痘的發(fā)生率又有增高的趨

2、勢，并且癥狀也比以前的嚴(yán)重，免疫失敗的情況也很常見。為了探討雞痘病毒是否發(fā)生了變異，同時(shí)建立比傳統(tǒng)的血清學(xué)方法更敏感、特異的分子生物學(xué)檢測方法，我們進(jìn)行了雞痘病毒分子遺傳學(xué)分析及PCR診斷方法的研究。 本試驗(yàn)對臨床疑似雞痘的患雞，進(jìn)行了病毒的分離、提純、鑒定、序列分析，建立了對雞痘病毒的PCR檢測方法，并進(jìn)行了初步應(yīng)用。 本試驗(yàn)首先對5例疑為皮膚型雞痘的病雞進(jìn)行了取樣及病毒的分離與鑒定。利用10日齡雞胚尿囊膜連續(xù)傳代3次

3、，經(jīng)病毒分離、病毒致病變效應(yīng)(CPE)、瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)等，證明所分離的病毒是雞痘病毒，命名為FPVSD1～5。 根據(jù)已經(jīng)發(fā)表的雞痘病毒的C型血凝素基因序列，自行設(shè)計(jì)引物，F(xiàn)PVSD1～5分離株通過PCR分別擴(kuò)增出了預(yù)期的647bp片段，經(jīng)過測序、序列比較分析對該基因序列的變異性研究表明：該序列與已經(jīng)發(fā)表的雞痘基因序列同源性高達(dá)100％，沒有發(fā)生基因變異。 又根據(jù)雞痘病毒Hypotheticalprotein基因序列，設(shè)計(jì)另