肺臟在心衰大鼠炎性細胞因子生成中的作用.pdf

1、1、背景心衰目前仍是嚴重危害人類健康及生活質(zhì)量的疾病，盡管心衰的治療已經(jīng)取得很大進展，但是心衰的發(fā)病率、死亡率并沒有明顯下降，甚至還存在上升趨勢。心衰的5年生存率低達30-50％。關(guān)于心衰發(fā)病機制的研究引起人們廣泛關(guān)注。心衰時存在體內(nèi)神經(jīng)內(nèi)分泌的激活及細胞因子網(wǎng)絡(luò)的紊亂已是人們的共識，但是關(guān)于細胞因子的產(chǎn)生來源問題觀點并不一致。心衰時存在腸道缺血等因素導(dǎo)致腸道細菌入血，進而在細菌的作用下激活體內(nèi)的免疫系統(tǒng)及炎性反應(yīng)，導(dǎo)致細胞因子的高表達

2、可能是心衰時細胞因子水平增高的發(fā)生機制之一，但有研究表明在心衰的早期即已經(jīng)存在體內(nèi)炎性因子表達水平的增高，這些細胞因子的產(chǎn)生來源機制尚需進一步探討。肺血管內(nèi)皮細胞是充血性心力衰竭左室功能異常時最先受影響的靶器官，高血壓、心梗等導(dǎo)致心衰的常見疾病，首先影響心臟的舒張功能，左室舒張功能異常引起肺循環(huán)壓力的升高，肺血管內(nèi)皮細胞切應(yīng)力發(fā)生變化，生物學(xué)性能隨之改變，進而內(nèi)皮細胞合成和分泌功能也會發(fā)生一系列的變化；包括一些神經(jīng)內(nèi)分泌物質(zhì)的合成減少，

3、及一些炎性細胞合成和分泌的增加，而炎性細胞因子濃度的變化會進一步影響心臟功能，導(dǎo)致心臟收縮及舒張功能的變化及心室的重構(gòu)，引起或加重心衰。 2、目的首先構(gòu)建大鼠的心衰模型，取心衰的不同階段的相應(yīng)組織標本及血清學(xué)資料，檢測在心梗后不同時期、不同臟器中細胞因子的表達情況及NF-kB的活化情況，從而探討在心衰的發(fā)生過程中不同臟器在細胞因子的生成中發(fā)揮的可能作用，并探討細胞因子水平的增高與NF-kB活化之間的關(guān)系，初步探討細胞因子的產(chǎn)生來

4、源及表達增高的發(fā)生機制。 3、研究材料與方法選健康成年雄性大鼠40只，應(yīng)用結(jié)扎冠狀動脈前降支的方法構(gòu)建大鼠的心梗后心衰模型，在術(shù)前、術(shù)后4周、16周分別進行大鼠的心臟超聲檢查，應(yīng)用無創(chuàng)方法評定大鼠的心臟功能，并同時采血，分離血清，檢測血清中TNF-α、IL-6的濃度，探討細胞因子濃度與大鼠心臟功能的關(guān)系；在術(shù)后4周，對手術(shù)組的15只大鼠進行血流動力學(xué)檢查，處死大鼠，排除心梗面積＜20％的大鼠共6只，留取其余9只大鼠的心臟、肺臟、

5、肝臟、脾臟作為心衰代償期的研究標本；在術(shù)后16周，聯(lián)合應(yīng)用大鼠心臟超聲及血流動力學(xué)的方法對大鼠的心功能進行評定，將大鼠分為心衰組及假手術(shù)組，初步評價無創(chuàng)性檢查手段—心臟超聲在大鼠心衰診斷中的應(yīng)用價值；留取心衰失代償組及假手術(shù)組大鼠臟器組織，對心衰不同時期及對照組(假手術(shù)組)大鼠的不同臟器標本TNF-α、IL-6的表達水平進行免疫組織化學(xué)、Westernblot及RT-PCR半定量檢測，并測定在不同組織中、同一組織心衰不同時期NF-kB活

6、性變化。 4、結(jié)果4.1假手術(shù)組應(yīng)用ELISA未檢測到血清中存在上述兩種細胞因子，心衰代償期TNF-α、IL-6的血清濃度均升高，在心衰失代償期，盡管仍能檢測到TNF-α，但血清水平成明顯下降趨勢；此時IL-6的血清濃度進一步升高；4.2大鼠血清細胞因子的水平與心臟超聲檢測及血流動力學(xué)水平均有較好的相關(guān)性，血清細胞因子水平較高的大鼠心臟超聲顯示射血分數(shù)低于細胞因子水平低的大鼠，且左室舒張末壓力水平較高，其中IL-6與上述指標的相

7、關(guān)性更加明顯；4.3在16周時，大鼠的心臟超聲與血流動力學(xué)檢測具有較高的診斷符合率，在80％以上，大鼠心臟超聲作為一種無創(chuàng)性的檢測手段，可以用于評定大鼠的心臟功能狀態(tài)，是一種有價值的檢測方法，但是受多種因素影響；4.4肺臟與其他臟器相比，TNF-α、IL-6的局部細胞因子濃度變化旱，在心衰代償期的表達水平就明顯升高；在心衰失代償期心、肝中TNF-α表達均較假手術(shù)組及代償期大鼠明顯增高，肺臟中TNF-α仍高，但較假手術(shù)組的表達呈下降趨勢，

8、且具有統(tǒng)計學(xué)差異，IL-6在心、肝、肺中均為高表達，尤其肝細胞內(nèi)表現(xiàn)為濃染的棕色顆粒，脾臟內(nèi)的淋巴細胞內(nèi)未觀察到兩種細胞因子的表達；炎性細胞因子的表達水平與局部組織NF-kB活化水平變化趨勢保持一致。 5、結(jié)論5.1在大鼠的心衰模型中，血清中細胞因子的濃度變化與組織中細胞因子的表達有一定的相關(guān)性；5.2細胞因子的持續(xù)升高與心梗后心臟功能的惡化有關(guān)，不同的細胞因子濃度變化存在不同的時相，TNF-α的升高早于IL-6，呈一過性增高趨

9、勢，后者在體內(nèi)尤其是血清中增高的持續(xù)時間較長，表達在心衰的代償及失代償期都升高，但失代償期增高更加明顯，可能與此時多種臟器內(nèi)IL-6生成增加有關(guān)，IL-6的血清細胞因子濃度與心功能損害的關(guān)系更大；5.3肺臟內(nèi)細胞因子的濃度變化早于其他三臟器，在細胞因子的生成中可能發(fā)揮啟動作用，在心衰的失代償期，除肺臟外，心、肝等臟器也參與了心衰時體內(nèi)細胞因子的生成及紊亂，且與血清中相應(yīng)細胞因子的濃度增高明顯相關(guān)，參與了心功能的進一步惡化；5.4在大鼠的