復合熒光染色法檢測人類精子頂體反應和存活率的相關研究.pdf

1、目的：同時使用Hoechst 33258/FITC-Pisum sativum agglutinin(FITC-PSA)復合熒光染色法檢測精子頂體反應和存活率，以評價此染色法的有效性和臨床應用價值。 材料方法：18名既往有生育史的男性提供新鮮精液標本。使用上游法收集標本中的存活精子。Hoechst 33258加入標本染色10分鐘，洗脫后涂片，吹干，再用FITC-PSA染色30分鐘。使用熒光顯微鏡觀測結(jié)果。同時進行CTC金霉素染色

2、法檢測頂體完整率，及伊紅染色檢測精子的存活率用以對照。實驗中使用鈣離子載體A23187誘發(fā)頂體反應，比較使用鈣離子載體A23187前后的頂體反應情況。 結(jié)果：觀察到4種不同染色結(jié)果的精子：a)存活的頂體反應的精子，b）存活的頂體完整的精子，c）死亡的頂體反應的精子，d) 死亡的頂體完整的精子。Hoechst 33258染色的結(jié)果和伊紅染色檢測的精子活率結(jié)果具有顯著相關性（r=0.633,P<0.01）。FITC-PSA和CTC檢

3、測精子頂體完整率結(jié)果具有顯著相關性（r=0.928，P<0.001）。Hoechst 33258/FITC-PSA復合染色可以發(fā)現(xiàn)鈣離子載體A23187具有誘發(fā)頂體反應的效果。經(jīng)鈣離子載體A23187處理后存活的頂體完整的精子百分比顯著降低(P<0.01)，死亡的頂體反應的精子和存活的頂體反應的精子百分比顯著升高(P<0.01,P<0.05)。死亡的頂體完整的精子百分比基本沒有變化。 結(jié)論：Hoechst 33258/FITC-