胃癌阿霉素敏感性預測模型的建立與驗證.pdf

1、化療是治療進展期胃癌的重要手段，阿霉素作為最常用的化療藥物之一，臨床上常與其他化療藥物（如5-氟尿嘧啶、順鉑）配伍用于胃癌的化療，但是臨床上胃癌化療的效果并不滿意，有文章報道胃癌對阿霉素的敏感性僅為30％，其中最主要的原因是胃癌細胞具有天然耐藥或者在化療過程通過接觸化療藥物中獲得耐藥性。因此，提前預測胃癌患者是否對阿霉素敏感對于化療效果非常重要，然而目前臨床并未常規(guī)開展藥物敏感性檢測的細胞學實驗，主要原因在于其細胞培養(yǎng)周期長、易污染、難

2、于標準化。利用基因芯片技術(shù)預測化療藥物敏感性已見諸報道，但此方法耗資巨大，對實驗室硬件條件要求較高，同樣也難以臨床常規(guī)開展。為此我們在本研究中探討是否可能利用基因芯片提供的信息，獲得一些能夠預測胃癌細胞阿霉素敏感性的關(guān)鍵分子，建立阿霉素耐藥預測模型。
　　【目的】：利用基因芯片信息建立胃癌阿霉素敏感性多分子預測模型，用于輔助臨床化療決策。
　　【方法】：1.cDNA微陣列分析技術(shù)檢測胃癌細胞及其阿霉素耐藥細胞SGC7901與

3、SGC-7901/ADR全基因表達譜間的差異基因；2.從斯坦福大學基因芯片數(shù)據(jù)庫(http://genome-www5.stanford.edu)引入另外一株胃癌阿霉素耐藥細胞EPG-257RDB及其親本細胞EPG-257P的全基因表達譜并分析其差異性基因；3.比較兩個細胞系間的共同差異性基因；4.利用cDNA微陣列分析軟件PAM篩選后續(xù)實驗的目的基因；5.采用RT-PCR技術(shù)檢測人胃癌組織標本中目的基因的表達情況；6.采用胃癌原代細胞

4、培養(yǎng)法測定人胃癌標本阿霉素敏感性；7.利用統(tǒng)計軟件對人胃癌組織標本中目的基因的表達情況及阿霉素敏感性作多元回歸分析，建立多分子預測模型；8.對驗證組的胃癌標本作相同的處理并統(tǒng)計分析多元回歸模型的可靠性。
　　【結(jié)果】：1.胃癌細胞及其耐藥細胞SGC7901與SGC-7901/ADR對比共發(fā)現(xiàn)差異性基因471個；EPG-257RDB與其親本細胞EPG-257P對比共發(fā)現(xiàn)差異性基因10,144個；2.通過對比兩個細胞系的胃癌細胞及其阿

5、霉素耐藥細胞的全基因表達譜，得到90個在表達上具有相同趨勢的差異性基因，其中僅PJA1在耐藥細胞低表達，余基因均在耐藥細胞中高表達；3.利用cDNA微陣列分析軟件PAM篩選后得到7個與阿霉素化療敏感性相關(guān)的候選基因，分別是ADAM22、CYR61、IFITM1、FN1、SPHK1、G1P2、GNAI1，均在耐藥細胞中高表達；4.利用NLReg統(tǒng)計軟件對20例人胃癌組織標本中候選基因的表達情況及阿霉素敏感性作多元回歸分析，建立多分子阿霉素

6、敏感性預測模型；此模型中IFITM1和G1P2這兩個基因被排除，預測模型的相關(guān)系數(shù)達0.8838；5.19例人胃癌組織標本給予同上的處理，對目的基因的表達情況及阿霉素敏感性結(jié)果進行驗證，證明建立的多分子阿霉素敏感性預測模型有效(r=0.7316)；6.對胃癌新鮮組織標本進行HDRA檢測發(fā)現(xiàn)阿霉素的敏感性低于30％。
　　【結(jié)論】：1.建立了基于ADAM22、CYR61、FN1、SPHK1、GNAI1這5個基因的多分子阿霉素敏感性預