miR-130a靶向調(diào)節(jié)PTEN基因影響人乳腺癌細(xì)胞對阿霉素的敏感性.pdf

1、目的：探討miR-130a對PTEN基因表達(dá)的調(diào)控，以及它們與乳腺癌MCF-7細(xì)胞株阿霉素耐藥的關(guān)系。
　　方法：利用miRNA芯片結(jié)合RT-qPCR的方法檢測并驗證miR-130a在人乳腺癌親代敏感細(xì)胞(MCF-7/S)、同系阿霉素耐藥細(xì)胞(MCF-7/Adr)和多西紫杉醇耐藥細(xì)胞(MCF-7/Doc)中的表達(dá)差異;通過靶基因預(yù)測軟件預(yù)測PTEN可能為miR-130a的特異性靶基因;通過miR-130a模擬物(mimics)和抑

2、制物(inhibitors)轉(zhuǎn)染實驗結(jié)合MTT法、RT-qPCR和免疫印跡法，觀察miR-130a的表達(dá)變化對乳腺癌細(xì)胞阿霉素耐藥性的影響及其與PTEN基因表達(dá)間的關(guān)系。
　　結(jié)果：與MCF-7/S相比，miR-130a在MCF-7/Adr中的表達(dá)水平明顯增高（116834.70±4728.32倍;t=19.035，P=0.000），但在多西紫杉醇耐藥株MCF-7/Doc中的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異(t=0.703，P=0.521)。MC

3、F-7/S細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-130amimics后，與陰性對照組相比，其miR-130a表達(dá)水平明顯增高（17.686±1.057倍;t=8.360，P=0.001），對Adr的耐藥性增強[IC50:(0.606±0.164)mg/L vs(0.181±0.060)mg/L; t=5.200，P=0.007]，同時PTEN mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯下調(diào)，分別為陰性對照組的0.362±0.076倍（t=2.927，P=0.043）和0.3

4、86±0.020倍(t=20.713，P=0.0003);而MCF-7/Adr轉(zhuǎn)染miR-130a inhibitors后，其miR-130a表達(dá)水平是陰性對照組的0.169±0.035倍（t=12.036，P=0.0002），對Adr的耐藥性明顯減弱[IC50:(23.366±1.304)mg/L vs(46.206±1.963)mg/L; t=16.784，P=0.007]，同時PTEN mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯上調(diào)，分別是陰性