中國(guó)紫蘇種質(zhì)資源調(diào)查及紫蘇葉揮發(fā)油化學(xué)型研究.pdf

1、紫蘇(Perillafrutescens(L.) Britt.)是唇形科紫蘇屬一年生直立草本植物，下有4個(gè)變種，分別為栽培類型紫蘇P.frutescens var.frutescens(L.) Britt.和回回蘇P.frutescens var.crispa(Thunb.) Hand.-Mazz.兩個(gè)變種，野生類型野生紫蘇P.frutescensvar.acuta(Thunb.)Kudo，和耳齒紫蘇P.frutescens var.a

2、uriculato-dentata C.Y.Wu etHsuan ex H.W.Li.，其中耳齒紫蘇較少見到。紫蘇葉是常用中藥，揮發(fā)油是紫蘇葉中主要成分，不同來源紫蘇的揮發(fā)油根據(jù)主成分的不同被劃分為不同的化學(xué)型，如PA型以紫蘇醛、檸檬烯為主，PK型以紫蘇酮為主，PL型以紫蘇烯為主，PP型以芳香類成分為主，以及其他幾個(gè)稀有類型。揮發(fā)油化學(xué)型的不同影響藥材的質(zhì)量。紫蘇葉揮發(fā)油在藿香正氣系列產(chǎn)品直接作為原料藥?！吨袊?guó)藥典》（2015年版）未制

3、定紫蘇葉的成分含量標(biāo)準(zhǔn)，而藿香正氣液制劑后附有紫蘇葉油標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定紫蘇醛含量不少于25％，紫蘇烯含量不少于20％。
　　我國(guó)是紫蘇資源大國(guó)，野生分布廣泛，栽培歷史有2000多年，因藥用和多種食用用途，栽培類型也極為豐富。本研究首先調(diào)查和尋找符合紫蘇葉油標(biāo)準(zhǔn)的PA型和PL型量大的紫蘇資源，進(jìn)行了全國(guó)范圍內(nèi)資源的廣泛調(diào)查和樣品搜集，獲得了43個(gè)量大的紫蘇資源及分布區(qū)域，據(jù)此確定出我國(guó)紫蘇資源的主要格局。用GC-MS方法分析了紫蘇葉樣品的

4、揮發(fā)油組成。按照產(chǎn)出類型可將紫蘇資源分為野生資源和栽培資源，野生資源主要為藥用;栽培資源又按主要用途分為栽培藥用資源、栽培籽用資源、栽培出口資源。野生藥用資源13份來自河南、四川、安徽、江西、廣西、湖南、江蘇及浙江，均為野生紫蘇變種，有PK和PA兩種化學(xué)型，以PK型居多;栽培藥用資源11份來自于河北安國(guó)、安徽亳州、重慶涪陵、廣西玉林和廣東茂名，6份為紫蘇變種，5份為回回蘇變種。包括了PA、PK、PL、PP和EK共5種化學(xué)型，回回蘇以PA

5、型居多;栽培籽用資源12份來自于甘肅慶陽、黑龍江樺南、吉林、重慶彭水及云南，均為紫蘇變種，并均為PK化學(xué)型;栽培出口資源3份來自于浙江湖州、江蘇連云港和山東煙臺(tái)，為出口日本鮮葉食用，2份為紫蘇變種，1份為回回蘇變種，均為PA型。國(guó)內(nèi)的紫蘇資源中以PK型為主，占60.5％，其次為PA型，占30.2％，PL型僅有1份，為稀有化學(xué)型。未發(fā)現(xiàn)PA和PL化學(xué)型共存在一個(gè)種質(zhì)類型的情況，符合標(biāo)準(zhǔn)的紫蘇葉油來自兩種不同種質(zhì)揮發(fā)油的組合。
　　選

6、擇PK、PA、 PL型各一個(gè)種質(zhì)種植于北京實(shí)驗(yàn)地，研究影響化學(xué)型和揮發(fā)油化學(xué)得率和組成的生長(zhǎng)發(fā)育因素。將不同的生長(zhǎng)發(fā)育期劃分為營(yíng)養(yǎng)期、開花期和果熟期，揮發(fā)油得率為:PA和PL型營(yíng)養(yǎng)期最高，PK型營(yíng)養(yǎng)期和花期均較高。三種化學(xué)型中相對(duì)含量前5位的成分在三個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育期的變化，PA型，單萜類成分紫蘇醛、D-檸檬烯和trans-Shisool，倍半萜類成分石竹烯、α-佛手柑油烯均表現(xiàn)為各發(fā)育期相對(duì)含量的穩(wěn)定性;PK型，單萜類的紫蘇酮和異白蘇烯酮隨

7、生長(zhǎng)發(fā)育前者上升，后者下降的趨勢(shì)，而二者之和相對(duì)穩(wěn)定，倍半萜類的石竹烯、α-法昵烯和石竹烯氧化物相對(duì)含量穩(wěn)定;PL型，單萜成分紫蘇烯，隨生長(zhǎng)發(fā)育相對(duì)含量大幅度降低，而倍半萜成分α-佛手柑油烯、石竹烯、大根香葉烯D的相對(duì)含量均呈增加趨勢(shì)，芳香類成分丁香酚相對(duì)含量也呈增加趨勢(shì)。另外每個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育期的早中晚的組分日變化，PA、PK和PL型表現(xiàn)不同。又在不同發(fā)育期采集了不同生熟度的葉（嫩葉、成熟葉、老熟葉），發(fā)現(xiàn)對(duì)于PA和PK型，葉片越趨于成熟其

8、揮發(fā)油組分越趨于構(gòu)成簡(jiǎn)單化，且主要成分相對(duì)含量變化不大;而PL型在生長(zhǎng)過程中其不同成熟度的葉揮發(fā)油組成和相對(duì)含量均相差較大，采收時(shí)應(yīng)區(qū)別對(duì)待。
　　搜集了來自國(guó)內(nèi)外的栽培紫蘇種子50份，種植于北京實(shí)驗(yàn)地，研究形態(tài)多樣性、化學(xué)型多樣性及相互關(guān)系，進(jìn)行種質(zhì)的初步評(píng)價(jià)。觀察獲取了18個(gè)紫蘇各部位形態(tài)特征，依據(jù)這些形態(tài)進(jìn)行聚類分析，可以聚為六類:Ⅰ:包括6個(gè)種質(zhì)，可歸為回回蘇變種，但葉色以兩面紫色為主，化學(xué)型多樣，有EK、PAPK、PKP

9、A、PA和PK5個(gè)化學(xué)型;Ⅱ:包括6個(gè)種質(zhì)，可歸為回回蘇變種，葉色以兩面綠色為主，均為PA型。Ⅲ:包括17個(gè)種質(zhì)，可歸為紫蘇變種，多數(shù)葉正面綠色背面淡紫色，均為PK型。Ⅳ:包括4個(gè)種質(zhì)，可歸為野生紫蘇變種，均為PK型。Ⅴ:包括7個(gè)種質(zhì)，可歸為紫蘇變種，葉綠色，均為PK型。Ⅵ:包括10個(gè)種質(zhì)，可歸為紫蘇變種，葉表面呈淺波狀皺褶，葉片肥厚，有PK、PP、PL和PA型4個(gè)化學(xué)型。
　　將上述22份種子，同時(shí)種植于甘肅實(shí)驗(yàn)地，北京和甘肅兩

10、試驗(yàn)地的海拔和年日照時(shí)數(shù)差別較大，比較異地種質(zhì)對(duì)揮發(fā)油組成的影響。有4個(gè)種質(zhì)化學(xué)型發(fā)生了變化，變化具體為甘肅PK型—北京PA型，甘肅PAEK型—北京EK型，甘肅EKPA型—北京PAPK型，甘肅PP型—北京PK型，其余化學(xué)型一致的18個(gè)種質(zhì)中，10個(gè)種質(zhì)主要成分較為一致，次要成分種類相對(duì)含量有一定差別;8個(gè)種質(zhì)主要成分種類及相對(duì)含量非常接近。表明化學(xué)型和組成一般不隨環(huán)境改變，但對(duì)于含有兩種以上不同化學(xué)型成分構(gòu)成的種質(zhì)，易于發(fā)生變化。