2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:從男性生殖健康角度入手,運用現(xiàn)代分子生物技術(shù)探討天蠶壯陽散提高雄性小鼠精原細(xì)胞DNA損傷的自我修復(fù)能力和降低精子畸變率的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)機制,為開發(fā)男性生殖保健品提供實驗依據(jù)。 方法:1.小鼠精子畸形試驗:首次給藥后5周末以頸椎脫臼法處死小鼠。剪開腹膜,取出睪丸,分離附睪。按wyrobek方法制片,鏡檢。在高倍鏡下檢查精子畸形。2.小鼠精原細(xì)胞SCE試驗:采用呂群等方法略加修改,取45mgIUrd和等量蔗糖混勻后壓成小藥片,埋于小

2、鼠腹部皮下,仔細(xì)縫合,于埋植IUrd藥片28h腹腔注射待測物。注藥30h后(即埋植IUrd58h)處死小鼠,取出睪丸。于處死動物前6h腹腔注射秋水仙素(4mg/kg)。精原細(xì)胞染色體制備和姐妹染色單體差別染色按常規(guī)方法進(jìn)行。SCE分析時,選擇摻入IUrd后經(jīng)過兩個復(fù)制周期,色差鮮明,含有二倍體數(shù)的中期分裂相觀察計數(shù).計數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)為:凡在染色體端部出現(xiàn)的互換計為一次SCE,在染色休中間出現(xiàn)的互換計為兩次SCE。每只動物計數(shù)20個中期分裂相,

3、然后算出每個細(xì)胞中SCE平均值。3.小鼠生殖細(xì)胞UDS試驗:按Sega法的改良方法進(jìn)行,將天蠶壯陽散水煎液按所需劑量給小鼠灌胃給藥;同時腹腔注射氫化可的松,小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉(8mg/Kg)麻醉,仰面固定,用75%酒精消毒下腹部皮膚,剪開陰囊,用微量注射器每側(cè)睪丸注入<'3>H-TDR20,消毒切口,不縫合,數(shù)日后自愈。17d后,頸椎脫臼處死小鼠,取精子,制備濾膜,干燥后將濾膜放入閃爍瓶中,加閃爍液5m1,用液體閃爍儀測定每分鐘放射

4、計數(shù)。 各實驗小鼠隨機分為4大組,即陰性對照組(NS ip);天蠶壯陽散水煎液誘變組(5×,10×,20×人的臨床常用劑量ig);天蠶壯陽散水煎液抗誘變組(5×,10×,20×人的臨床常用劑量ig+氫化可的松(25mg/kg/d)ig);陽性對照組(即腎陽虛組)。每組5只動物。 結(jié)果:1.小鼠精子畸形試驗:天蠶壯陽散水煎液各劑量組誘發(fā)的小鼠精子畸形率與陰性對照組相比無顯著差別。天蠶壯陽散水煎液各劑量組對由氫化可的松誘發(fā)的

5、小鼠精子畸形有明顯的抑制作用,且隨劑量升高,降低作用逐漸增強,呈劑量-反應(yīng)正相關(guān)趨勢。2.小鼠精原細(xì)胞SCE試驗:天蠶壯陽散水煎液各劑量組誘導(dǎo)的SCE與陰性對照組相比均無顯著性差異。天蠶壯陽散水煎液可使氫化可的松誘導(dǎo)的小鼠精原細(xì)胞SCE頻率明顯降低,劑量一效應(yīng)關(guān)系明顯。經(jīng)雙側(cè)t檢驗分析,除5倍人臨床常用劑量組外,天蠶壯陽散抗誘變試驗其余各組與氫化可的松組比較,差異明顯。3.小鼠生殖細(xì)胞UDS試驗:天蠶壯陽散水煎液各劑量組誘導(dǎo)的UDS與陰

6、性對照組相比均無顯著性差異。氫化可的松對小鼠精子誘發(fā)了明顯的UDS反應(yīng),天蠶壯陽散水煎液可使氫化可的松誘發(fā)的小鼠精子UDS值明顯降低,在一定劑量范圍內(nèi),隨著天蠶壯陽散水煎液濃度的增加,UDS值降低的愈明顯。 結(jié)論:實驗結(jié)果顯示天蠶壯陽散水煎液不引起小鼠精子畸變、精原細(xì)胞染色體畸變及小鼠生殖細(xì)胞UDS,即對小鼠生殖細(xì)胞無誘變作用,而且天蠶壯陽散對氫化可的松引起小鼠精子畸型、精原細(xì)胞染色體畸變及氫化可的松誘發(fā)的小鼠生殖細(xì)胞IJDS均

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