氰戊菊酯誘導(dǎo)雄性小鼠生殖細胞凋亡的分子機制探討.pdf

1、目的:研究氰戊菊酯誘導(dǎo)的小鼠睪丸生殖細胞凋亡,探討Fas/FasL信號通路和線粒體信號通路在氰戊菊酯誘導(dǎo)小鼠睪丸生殖細胞凋亡過程中的作用。
　　方法:將36只SPF級6周齡雄性ICR小鼠隨機分為對照組、氰戊菊酯低劑量暴露組和氰戊菊酯高劑量暴露組。氰戊菊酯暴露組小鼠連續(xù)每天給予氰戊菊酯灌胃染毒(15mg/kg或60mg/kg,10ml/kg,溶于玉米油),連續(xù)染毒28天,對照組小鼠灌胃等容量玉米油溶劑。末次染毒24h后處死小鼠,取睪

2、丸組織稱重并進行組織病理學(xué)檢查;用末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)檢測小鼠睪丸生殖細胞凋亡發(fā)生情況;用蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測小鼠睪丸組織細胞凋亡信號通路相關(guān)蛋白的表達水平。
　　結(jié)果:和對照組相比,氰戊菊酯不同劑量暴露組小鼠睪丸組織重量和睪丸系數(shù)均顯著降低(P<0.05),睪丸組織成熟期(VII–VIII期)生精小管生精細胞層數(shù)減少,生精細胞較少且排列紊亂;TUNEL檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),和對照組相比,氰戊菊酯各劑量暴露組平均每個生精小管凋亡細胞數(shù)和凋亡

3、細胞陽性生精小管百分率均顯著升高(P<0.01);進一步分析發(fā)現(xiàn),細胞凋亡主要發(fā)生在睪丸組織成熟期(VII–VIII期)生精小管和IX–XII期生精小管;蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果顯示,和對照組相比,氰戊菊酯各劑量暴露組睪丸組織裂解型Caspase-3蛋白水平顯著上調(diào);進一步研究發(fā)現(xiàn),睪丸組織Fas、FasL和裂解型Caspase-8蛋白水平顯著上調(diào),且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系;小鼠睪丸組織Bax、Bcl-2蛋白水平和對照組相比無明顯變化;與對照組相比