氰戊菊酯神經(jīng)發(fā)育毒性體外研究.pdf

1、目的：以體外培養(yǎng)的小鼠神經(jīng)干細(xì)胞（mNSC）和小鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞為模型，研究氰戊菊酯（FEN）對(duì)誘導(dǎo)分化的神經(jīng)干細(xì)胞和海馬神經(jīng)細(xì)胞的毒性作用以及氰戊菊酯對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞遷移、分化和神經(jīng)元生長(zhǎng)發(fā)育的影響，初步探討氰戊菊酯神經(jīng)發(fā)育毒性作用特點(diǎn)及可能的細(xì)胞機(jī)制。
　　 方法：以不同劑量的FEN對(duì)誘導(dǎo)分化的mNSC和海馬神經(jīng)細(xì)胞染毒，測(cè)定染毒48 h后的細(xì)胞毒性，并采用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的方法分析mNSC的遷移、分化及神經(jīng)元的生長(zhǎng)發(fā)育狀況。

2、r>　　 結(jié)果：氰戊菊酯對(duì)誘導(dǎo)分化的mNSC和海馬神經(jīng)細(xì)胞有細(xì)胞毒性作用，且呈劑量依賴性（①FEN對(duì)mNSC的細(xì)胞毒性：MTT法，r=-0.831；LDH法，r=0.752；PI染色法，r=0.835；②FEN對(duì)海馬神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞毒性：LDH法，r=0.52。均P<0.01）。在不引起明顯細(xì)胞毒性的條件下，F(xiàn)EN能明顯抑制mNSC的遷移（r=-0.775，P<0.01）和分化（Sox2陽(yáng)性細(xì)胞比例升高，r=0.84，P<0.01），主

3、要抑制神經(jīng)干細(xì)胞向星形膠質(zhì)細(xì)胞的分化（GFAP陽(yáng)性細(xì)胞比例降低，r=-0.799，P<0.01），而對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元分化沒(méi)有顯著作用；FEN還能抑制海馬神經(jīng)元的生長(zhǎng)發(fā)育，減少神經(jīng)元的突起數(shù)目（r=-0.885，P<0.01）和長(zhǎng)度（①總長(zhǎng)度r=-0.906；②平均長(zhǎng)度r=-0.868，均P<0.01），而對(duì)海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有明顯作用。
　　 結(jié)論：在本實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，低劑量FEN抑制mNSC的遷移和分化，對(duì)向星形膠質(zhì)