環(huán)境雌激素氰戊菊酯對(duì)小鼠生精過程的影響.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)通過應(yīng)用光鏡、免疫組織化學(xué)、TUNEL染色及放射免疫測(cè)量等方法，探討不同濃度的氰戊菊酯(FenvalerateFen)對(duì)小鼠生精細(xì)胞凋亡的影響及PCNA、P53表達(dá)的變化.從形態(tài)學(xué)角度探討氰戊菊酯對(duì)雄性小鼠生精過程的影響，為野生動(dòng)物的保護(hù)及提高人口質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。 研究方法：選用性成熟昆明雄性小鼠40只，將40只小鼠隨機(jī)分為4組，氰戊菊酯給藥0.0mg/kg、1.7mg/kg、8.5mg/kg、42.5mg/kg組，每日

2、灌胃一次，共30天，然后進(jìn)行如下指標(biāo)的檢測(cè)。 1.小鼠摘眼球取血，離心后取上清，采取放射免疫(RIA)法檢測(cè)血清睪酮的含量。 2.精子計(jì)數(shù)3脫頸椎處死小鼠，取雙側(cè)睪丸,Bouin液固定，常規(guī)石蠟包埋、切片，片厚6um,HE染色，觀察睪丸生精小管形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化；SP免疫組化法檢測(cè)睪丸生精細(xì)胞的PCNA、P53的表達(dá)情況，TUNEL法檢測(cè)生精細(xì)胞凋亡情況。 研究結(jié)果： 1.隨Fen濃度增加，精子生成量減少。

3、 2.血漿睪酮(T)含量：對(duì)照組小鼠血清T含量為0.56nmol/L,8.5mg/kg組為0.45nmol/L，42.5mg/kg組為0.36nmol/L，8.5mg/kg、42.5mg/kg組與對(duì)照組比較P＜0.05。 3.HE染色：生精小管內(nèi)生精細(xì)胞稀疏、排列紊亂，管腔內(nèi)有大量脫落的精母細(xì)胞、精子細(xì)胞。 4.PCNA：免疫陽性細(xì)胞主要包括精原細(xì)胞和初級(jí)精母細(xì)胞，部分支持細(xì)胞和肌樣細(xì)胞也可見著色；免疫陽性產(chǎn)物位于

4、細(xì)胞核，通常為棕黃色顆粒，用藥組與對(duì)照組相比PCNA陽性細(xì)胞率變化不明顯P＞0.05。 5.p53表達(dá)：P53陽性細(xì)胞主要是精原細(xì)胞，部分支持細(xì)胞間質(zhì)細(xì)胞也有著色。陽性產(chǎn)物主要位于細(xì)胞核，呈棕黃色，8.5mg/kg、42.5mg/kg組P53陽性細(xì)胞率明顯高于對(duì)照組P＜0.05。 6.凋亡：各組小鼠睪丸生精細(xì)胞均有凋亡發(fā)生，凋亡細(xì)胞位于生精小管基底部，在8.5mg/kg、42.5mg/kg組凋亡細(xì)胞成簇存在，區(qū)別于正常小