氰戊菊酯對(duì)草魚CYP3A活性的影響及組織毒理學(xué)研究.pdf

1、農(nóng)藥擬除蟲菊酯在水產(chǎn)養(yǎng)殖中除用作清塘藥物外，還常用于防治魚類錨頭鰠、中華鳋、鲺等甲殼類寄生蟲，有較好的效果?；跀M除蟲菊酯對(duì)魚類和水生生物的毒性，本試驗(yàn)選取氰戊菊酯作為暴露源，以1齡草魚[（109.27±15.26）g]為研究對(duì)象，從氰戊菊酯對(duì)草魚Ⅰ相藥物代謝酶(CYP3A)活性的影響、遺傳物質(zhì)的損傷、血液生化指標(biāo)的改變及組織細(xì)胞形態(tài)的損傷幾方面探討其毒性，評(píng)估其在水產(chǎn)動(dòng)物病害防治中的利弊，為漁藥研究積累科學(xué)數(shù)據(jù)。
　　 1.氰

2、戊菊酯對(duì)草魚CYP3A活性的影響設(shè)計(jì)選取氰戊菊酯對(duì)草魚96h-LC50的1/50、1/10、1/53個(gè)濃度組，即1.2、6、12μg/L作為試驗(yàn)組，同時(shí)設(shè)定1個(gè)空白對(duì)照組，1個(gè)10mg/L的恩諾沙星作為陽(yáng)性對(duì)照組，于第一次染毒后第1、2、3、6、9天采樣，用探針?biāo)幖t霉素研究了草魚CYP3A酶的組織分布以及氰戊菊酯對(duì)草魚肝微粒體CYP3A活性的影響。結(jié)果顯示：CYP3A酶活性存在于草魚肝臟、鰓、腎臟、脾、腸、腦組織中，其中肝臟中活性最高，

3、是其它組織的2～4倍，其次為鰓＞腎臟＞脾臟＞腸＞腦；氰戊菊酯在一定濃度和時(shí)間范圍內(nèi)能顯著抑制CYP3A的活性，這種抑制隨暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)，但抑制趨勢(shì)減弱。除染毒后第1天1.2μg/L濃度組CYP3A活性與空白對(duì)照組無(wú)顯著性差異（P＞0.05），其余濃度組以及1.2μg/L濃度組染毒后的2、3、6、9d與空白對(duì)照組均有顯著性(P＜0.05)和極顯著性差異（P＜0.01），活性下降幅度為7.7％～68.7％。
　　 2.氰戊菊酯

4、對(duì)草魚遺傳毒性研究將草魚暴露于0、1.2、6、12μg/L的氰戊菊酯中，選取650μg/L環(huán)磷酰胺作為陽(yáng)性對(duì)照，于第一次染毒后的第1、3、6、9天采樣，通過(guò)微核試驗(yàn)的方法考察氰戊菊酯對(duì)草魚的遺傳損傷情況。結(jié)果顯示，1.2μg/L以上的氰戊菊酯能顯著提高草魚外周血細(xì)胞的微核率、核異常率以及總核異常率，微核率最高達(dá)7.59×10-3，為空白對(duì)照組18.51倍；最低為2.07×10-3，為空白對(duì)照的5.05倍；核異常率最高為16.58×10-

5、3,為空白對(duì)照的3.41倍，最低為3.87×10-3，低于空白對(duì)照；總核異常率最高為21.4×10-3,最低為5.93×10-3，分別為空白對(duì)照組的4.06倍和1.13倍。三者的變化趨勢(shì)均是隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)先升高，達(dá)到峰值后再緩慢下降，微核率在一定濃度和時(shí)間范圍內(nèi)有濃度劑量效應(yīng)以及時(shí)間劑量效應(yīng)相關(guān)性。
　　 3.氰戊菊酯對(duì)草魚生化指標(biāo)的影響將草魚暴露于0、1.2、6、12μg/L的氰戊菊酯中，于第一次染毒后的第1、2、3、6、

6、9天采樣，通過(guò)全自動(dòng)生化分析儀，測(cè)定草魚血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)的活性。9d的染毒結(jié)果顯示：AST、ALT隨暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，但ALT變化遲于AST；且中、高濃度組在暴露2～6d時(shí)，AST與空白對(duì)照組比較顯著升高（P＜0.05），之間差異不明顯（P＞0.05）；9d時(shí)，3濃度組血清AST均顯著性升高(P＜0，05)，之間差異顯著（P＜0.05）。暴露的第3～9天，高濃度組A

7、LT與空白對(duì)照組比較才有顯著性差異（P＜0.05），暴露9d時(shí)，中濃度組才顯著升高（P＜0.05），低濃度組始終無(wú)顯著升高（P＞0.05）。各濃度組和各時(shí)間點(diǎn)的ALP活性均與對(duì)照組無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。TP的活性在暴露6d時(shí)，各濃度組才受到明顯抑制(P＜0.05)；暴露9d時(shí)，TP的活性有回升的趨勢(shì)，只在高濃度組才有明顯的抑制（P＜0.05）。
　　 4.氰戊菊酯對(duì)草魚的組織病理觀察通過(guò)對(duì)暴露于以上不同濃度、不同時(shí)間的草

8、魚鰓、肝臟、腎、肌肉等組織進(jìn)行病理切片觀察，結(jié)果顯示：染毒3d，各濃度組的草魚鰓小片開(kāi)始充血，隨著染毒時(shí)間延長(zhǎng)，黏液細(xì)胞浸潤(rùn)加劇、鰓小片上皮細(xì)胞游離，不明細(xì)胞團(tuán)增大增多。染毒3d，高濃度組草魚肝臟出現(xiàn)病理變化；隨著染毒時(shí)間的延長(zhǎng)，各濃度組的草魚肝細(xì)胞有不同程度的水樣變性、變大、變圓，肝竇淤血等現(xiàn)象；9d高濃度組的草魚肝臟局部細(xì)胞壞死。染毒6d后，中、高濃度組的草魚腎臟腎間質(zhì)細(xì)胞增多，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小管上皮細(xì)胞水樣變性。骨骼肌在染毒6d

9、時(shí)只有高濃度組表現(xiàn)出不規(guī)則的跡象；染毒9d時(shí)隨著染毒濃度的增加，骨骼肌肌絲紋理排列更加紊亂和松散。
　　 綜上所述，氰戊菊酯在水產(chǎn)生產(chǎn)上的常用劑量范圍內(nèi)（1～2μg/L）單次用藥對(duì)草魚的Ⅰ相藥物代謝酶(CYP3A)活性、草魚的血液生化、組織損傷影響不顯著；在上述范圍內(nèi)，氰戊菊酯會(huì)損傷正在分裂細(xì)胞的DNA，可能導(dǎo)致畸形和腫瘤的產(chǎn)生。重復(fù)用藥氰戊菊酯會(huì)抑制Ⅰ相藥物代謝酶(CYP3A)活性；當(dāng)氰戊菊酯濃度超過(guò)6μg/L會(huì)導(dǎo)致鰓、肝臟、