輻射誘導(dǎo)造血、免疫、生殖細胞凋亡的分子機制研究.pdf

1、本研究的目的是1.研究輻射對骨髓、脾臟、胸腺、睪丸、肝臟細胞的凋亡及P53基因表達的影響。2.研究當歸多糖(APS)對小鼠免疫、生殖功能輻射損傷的治療作用及機理。 方法： 1.X線全身照射小鼠，采用HE染色，用普通光鏡、流式細胞儀(FCM)等技術(shù)手段檢測細胞凋亡；用免疫組織化學(xué)方法：鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化酶連接(S-P)法檢測P53蛋白的表達。2.用外周血細胞計數(shù)，胸腺、脾臟、睪丸指數(shù)等方法觀察了APS對X射線照射5

2、Gy小鼠免疫、生殖功能的影響；采用流式細胞儀和S-P免疫組織化學(xué)方法檢測APS對小鼠胸腺、脾臟、睪丸細胞凋亡率及P53蛋白表達的影響。 結(jié)果： 1.照射劑量在2-8GY范圍內(nèi)，骨髓、脾臟、胸腺、睪丸、肝臟細胞凋亡率隨照射劑量的增加而升高，各時間段凋亡率存在顯著性差異(P＜0.01)。2-8GY的X線照射后12小時內(nèi)，骨髓、脾臟、胸腺、睪丸細胞凋亡率隨時間的延長而增高，細胞周期阻滯于G1期，凋亡率最高在照射后8-12小時。

3、肝臟照后凋亡率最高出現(xiàn)在24小時，S期和G2/M期阻滯細胞增多。2.P53蛋白于細胞凋亡時增加，與對照組有顯著性差異(P＜0.05)，肝臟中P53蛋白的表達陰性。3.APS用藥組，小鼠輻射損傷后第3天外周血象(WBC：3.1×109、PLT：295×109)高于單純照射組(WBC：1.8×109PLT：66.8×109)(P＜0.05)。APS組輻射后第7天，胸腺、脾臟、睪丸指數(shù)(分別為17.4mg/10g、23.3mg/10g、32.

4、5mg/10g)高于單純照射組(分別為14.5mg/10g、14.7mg/10g、2.6mg/10g)，差異顯著(P＜0.05)。照射后12小時，APS組與單純照射組細胞凋亡率無明顯差異(P＞0.05)。給藥后第7天，給藥組細胞凋亡率與正常組無明顯差異(P＞0.05)，APS組P53蛋白的表達低于單純照射組，差異顯著(P＜0.05)。 結(jié)論： 1.電離輻射可誘導(dǎo)小鼠胸腺、脾臟、睪丸、骨髓細胞發(fā)生凋亡，細胞周期被阻滯在G1