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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討Sir2是否對(duì)SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅具有神經(jīng)保護(hù)作用及其與自噬的相關(guān)性。
方法:選用Gmr-GAL4和Nrv2-GAL4驅(qū)動(dòng)子,利用經(jīng)典的GAL4-UAS系統(tǒng),將含有78個(gè)CAG重復(fù)擴(kuò)增的ataxin-3蛋白片段(MJDtr-Q78)分別在果蠅眼睛和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元內(nèi)選擇性表達(dá),構(gòu)建Gmr-GAL4/UAS和Nrv2-GAL4/UAS系統(tǒng)SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅模型,通過(guò)遺傳干預(yù)使Sir2在GMR-GAL4/UAS系
2、統(tǒng)SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅視網(wǎng)膜光感受神經(jīng)元和Nrv2-GAL4/UAS系統(tǒng)SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元內(nèi)過(guò)表達(dá),觀察Sir2過(guò)表達(dá)對(duì)果蠅視網(wǎng)膜光感受神經(jīng)元變性和果蠅運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元變性是否具有神經(jīng)保護(hù)作用,然后通過(guò)RNAi技術(shù)抑制自噬相關(guān)基因Atg7的表達(dá),觀察Sir2對(duì)果蠅視網(wǎng)膜光感受神經(jīng)元變性及運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元變性的改善程度,從而驗(yàn)證這種保護(hù)作用是否與自噬相關(guān)。
結(jié)果:發(fā)現(xiàn)Sir2過(guò)表達(dá)明顯抑制了SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅
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