Yippee轉基因果蠅品系的建立及基因功能的初步研究.pdf

1、翰溯失幸碩士學位論文rj加ee轉基因果蠅品系的建立及基因功能的初步研究學科專業(yè)學位類型研究生姓名導師姓名、職稱論文編號生物化學及分子生物學口科學學位口專業(yè)學位彭忠祿吳秀山教授湖南師范大學學位評定委員會辦公室二零零八年十月摘要心臟發(fā)育是一個錯綜復雜的過程，在分子機理上被一套進化上保守的轉錄因子(NKZ、MEFZ、GATA、Tbx和H等)控制，它們決定心臟細胞的發(fā)育方向，決定了編碼收縮蛋白基因的表達和心臟結構形態(tài)的建成。同時，它們在神經發(fā)生

2、、心肌細胞發(fā)生、血細胞發(fā)生和癌細胞發(fā)生過程中也發(fā)揮著重要的調節(jié)作用。本文研究的衛(wèi)藝朋ee基因編碼一個高度保守序列的鋅指結合蛋白，從真菌到人類的68種真核生物中都發(fā)現了它的同源蛋白。州即ee在果蠅發(fā)育的不同階段以及在人類胎兒的不同組織中廣泛表達，提示衛(wèi)分pee可能具有重要的生物學功能。2003年，通過酵母雙雜交作用繪制的果蠅蛋白相互作用圖譜顯示，衛(wèi)藝即ee基因通過‘谷了另76基因與心臟發(fā)育相關基因Wg、MefZ等有聯系，即衛(wèi)藝即ee基因可

3、能影響心臟發(fā)育調控基因的信號途徑，故推測衛(wèi)藝朋ee可能與心臟發(fā)育相關。我們采用RT一PCR的方法擴增果蠅廠萬朋ee基因cDNA，構建puAs一YIPPee一工REs一GFP綠色熒光過表達質粒，再通過果蠅胚胎顯微注射和mini一white標記基因篩選建立了轉基因果蠅品系。將該轉基因品系與H一GAL4雜交、朋A干擾品系分別與Hand一GFP品系雜交，在熒光顯微鏡下觀察雜交后代的心管和淋巴腺的表型改變，以期來確定萬朋ee基因在心臟發(fā)育調控中的