反義核苷酸靶向納米縮合體研究.pdf

1、授予單位代碼10459學號或申請?zhí)枺篞33壘!121密級：鄭州大學碩士學位論文論文題目：反義核苷酸靶向納米縮合體研究作者姓名：學科門類：專業(yè)名稱：導師姓名、職稱：宋旭藥學藥理學張振中教授二零零六年五月總之，本研究建立了一個制備DNA靶向縮合體的新方法。該方法可以在反義核營酸聚賴氨酸縮合體表面包上一層靶向于腫瘤細胞的多肽。由于反義核苷酸包在靶向縮合體內(nèi)部，最外‘層多肽的功能基團可以任意改變，因此這將為非病毒DNA遞送體系的相關(guān)研究提供一個

2、新的思路。第—部分：反義棱苷酸聚賴氨酸縮臺研究方法：1反義核苷酸一聚賴氨酸縮合體的制備采用均勻設(shè)計法考察DH值，反義核苷酸濃度，離子強度，正負電荷比(聚賴氨酸所帶的正電荷與反義核苷酸所帶的負電荷的比值)對反義核苷酸聚賴氨酸縮合體的粒徑和zeta電位的影響。其縮合體制備方法如下：取小同pH值的HEPEs緩沖液各06mL，依次加入氯化鈉溶液，反義核苷酸貯備液和聚賴氨酸貯備液。使最終溶液中pH值總As0N濃度正負電荷比，離子強度值達到實驗設(shè)計

3、值。其中離予強度以氯化鈉濃度代表，正／負電荷比是指賴氨酸殘基數(shù)與DNA分子中的脫氧核苷酸數(shù)之比。參照文獻，按每個賴氨酸殘基貢獻’個『F電荷，每個脫氧核苷酸貢獻一個負電荷，賴氨酸殘基和脫氧核苷酸的分子量分別按照209道爾頓和310道爾頓來計算。2縮合體粒徑的測量采用Nanozs90激光粒度分析儀測定粒徑，折射率設(shè)置為1590，吸收系數(shù)設(shè)置為0010，溫度設(shè)置為25℃，測量模式設(shè)置為自動以數(shù)均分布(sizedistrib眥ionbynlll

4、】曲er)的第’‘個峰的平均值(peaklmean)為測定結(jié)果。測量在制備后5分鐘內(nèi)完成。各組縮合體的配制方法如上。每組縮合體均配制3份，每份測量一次，每組共測量三次，取其平均值作為測量結(jié)果。3縮合體zeta電位的測量采用Nano—zS90測定并組縮合體的zeta電位。介電常數(shù)設(shè)置為79，黏度系數(shù)設(shè)置為O8872，溫度設(shè)置為25℃，測量模式設(shè)置為自動。測量在制備后5分鐘內(nèi)完成。各組縮合體的制備方法如上。每組縮合體均配制3份，每份測量一次