卵巢黃素化顆粒細(xì)胞瘦素受體后信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子—STAT3磷酸化與多囊卵巢綜合征發(fā)病關(guān)系的研究.pdf

1、目的：臨床觀察約50%多囊卵巢綜合征（Polycystic ovarian syndrome，PCOS）患者出現(xiàn)肥胖，并且大多數(shù)PCOS 患者在出現(xiàn)癥狀之后，體重存在逐漸增高的趨勢(shì)，進(jìn)一步導(dǎo)致了婦女體內(nèi)生殖內(nèi)分泌紊亂。瘦素能直接抑制IGF-1對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞的作用，從而抑制顆粒細(xì)胞分化與卵細(xì)胞成熟，阻斷優(yōu)勢(shì)卵泡的選擇及卵泡發(fā)育，導(dǎo)致不排卵。
　　 但具體作用機(jī)制尚不十分清楚。JAK2-STAT3 途徑目前被認(rèn)為是瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要

2、途徑，該途徑主要通過瘦素長(zhǎng)受體激活。本研究通過檢測(cè)肥胖型和非肥胖型PCOS 患者卵巢黃素華顆粒細(xì)胞表面瘦素長(zhǎng)受體mRNA（OB-RLmRNA）和胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子STAT3 磷酸化（p-STAT3）的水平，探討瘦素在PCOS發(fā)病機(jī)制中的作用。同時(shí)，本實(shí)驗(yàn)還觀察了不同濃度的瘦素對(duì)體外培養(yǎng)的正常人群卵巢黃素化顆粒細(xì)胞OB-RLmRNA和p-STAT3的影響，探討OB-RLmRNA和p-STAT3與瘦素及PCOS之間的關(guān)系。
　　 方法

3、：取行體外受精-胚胎移植（IVF-ET）治療的肥胖型PCOS 患者（肥胖PCOS組）、非肥胖型PCOS 患者（非肥胖PCOS組）、排卵功能正常和單純輸卵管因素不孕的肥胖（正常肥胖組）及正常體重婦女（正常對(duì)照組）各10例，回收卵子后留取卵泡液，沉淀黃素化顆粒細(xì)胞。分別采用半定量RT-PCR和免疫印跡法（Western blot）檢測(cè)黃素化顆粒細(xì)胞OB-RLmRNA的表達(dá)和瘦素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子p-STAT3 水平。同時(shí)另取同期正常對(duì)照組人卵巢黃

4、素化顆粒細(xì)胞進(jìn)行體培養(yǎng)，并給予不同濃度瘦素（0、10、100、1000 ng/ml）刺激48h，分別測(cè)定各個(gè)濃度瘦素刺激下的人卵巢黃素化顆粒細(xì)胞表面OB-RLmRNA的表達(dá)和p-STAT3 水平。
　　 結(jié)果：(1)RT-PCR結(jié)果顯示，正常對(duì)照組、正常肥胖組、非肥胖PCOS和肥胖PCOS組卵巢黃素化顆粒細(xì)胞瘦素OB-RLmRNA表達(dá)水平依次增高，各組間表達(dá)差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。(2)肥胖PCOS組、正常肥胖組、

5、非肥胖PCOS組和正常對(duì)照組卵巢黃素化顆粒細(xì)胞p-STAT3 水平分別為（24.28±0.51）、（21.31±1.32）、（11.69±0.67）、（9.03±0.20），各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），其中肥胖PCOS組卵巢黃素化顆粒細(xì)胞p-STAT3表達(dá)水平最高；(3)瘦素體外能明顯促進(jìn)卵巢黃素化顆粒細(xì)胞OB-RLmRNA和p-STAT3的表達(dá)（P<0.01），并呈濃度依賴性，當(dāng)瘦素濃度達(dá)到100ng/ml時(shí)，OB-R