干熱河谷幾種根瘤菌的16S rRNA測定.pdf

1、干熱河谷是西南地區(qū)橫斷山區(qū)一種非常特殊的氣候類型，該地區(qū)的氣候特點主要是干熱少雨，且季節(jié)變化明顯。干熱河谷地區(qū)的植被恢復(fù)及其困難，選擇什么樣的樹種用于干熱河谷地區(qū)造林；及如何使植被在受到干熱環(huán)境脅迫時能夠安全度過危險期是當前科研界的難點和熱點。國內(nèi)對此問題的研究還處于初期階段，尚未取得突破性進展。豆科固氮樹種具有較高的經(jīng)濟價值，對不良環(huán)境抗逆力強，在改良土壤、提高土壤肥力、保持水土和改善生態(tài)環(huán)境中占有重要的地位，而這些作用與它的結(jié)瘤固氮

2、性能密切相關(guān)。
　　 我國豆科固氮樹種和根瘤菌的資源十分豐富，與豆科植物共生的根瘤菌不僅為植物固定了相當數(shù)量的大氣氮，也為土壤提供了大量的氮素。而且與豆科樹種共生的根瘤菌除了能夠和豆科植物共生從而提高豆科植物的固氮量，其本身的抗逆性也存在一定的差異。干熱河谷根瘤菌有別于其他地區(qū)的根瘤菌，分離于干熱河谷的根瘤菌均具有較好的耐高溫抗干旱的特性。
　　 本研究在以往的研究基礎(chǔ)上，通過提取干熱河谷固氮豆科樹種根瘤菌基因組DNA，

3、經(jīng)過PCR擴增，采用16S rDNA PCR RFLP對待測菌株進行初步分群，測定中心菌株16S rRNA的全序列，對其進行研究，以揭示這些固氮豆科樹種根瘤菌的系統(tǒng)發(fā)育地位，尋找并保存新的、優(yōu)良的根瘤菌種質(zhì)資源，為干熱河谷地區(qū)的荒山造林等人工栽培提供優(yōu)良的接種劑。
　　 對分離自我國金沙江干熱河谷地區(qū)的固氮豆科樹種根瘤菌進行分離鑒定和系統(tǒng)發(fā)育研究，得出以下結(jié)論：
　　 1.本次試驗分離的固氮豆科樹種根瘤菌在BTB培養(yǎng)基上

4、產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基變成黃色，是快生型根瘤菌。
　　 2.山毛豆、銀合歡、臺灣相思的根瘤菌可以相互結(jié)瘤，屬于同一個互接種族，本試驗研究發(fā)現(xiàn)在同一個生態(tài)環(huán)境中，兩種宿主植物對根瘤菌的選擇具有一定的偏好性。
　　 3.28株分離自銀合歡、臺灣相思、山毛豆的待測菌株位于Rhizobium系統(tǒng)發(fā)育分支。另有兩株位于Pseudomonas分支，還有一株位于Enterobacter分支，這些菌株歸于Y-變形桿菌。這些菌株進入根瘤的機制有待

5、研究。
　　 4.YM8-17(03)是金沙江干熱河谷固氮豆科樹種根瘤菌的優(yōu)勢菌株，菌株YM8-17(03)、FDY8(011)、92-1-8(31)雙向自帶的測序結(jié)果出現(xiàn)了重疊峰，測序失敗，這有可能是模板存在污染或是由于引物與模板的結(jié)合性不單一導致擴增過程中有大小相近的非特異性條帶雜片段產(chǎn)生，而瓊脂糖回收無法分離這樣的片段所致。建議重新試驗，進行基因克隆。
　　 5.根瘤菌的分類聚群與寄主之間沒有明確的對應(yīng)關(guān)系，與地理