蒙藥復方四味土木香散血中移行成分及其抗氧化活性研究.pdf

1、目的:研究四味土木香散血中移行成分及其血清藥理作用。
　　方法:(1)給藥樣品的制備及其一致性和穩(wěn)定性檢查:①按《中國藥典》(2010年版)各藥材項下含量測定方法對原料藥材進行含量測定;②確定四味土木香散凍干粉的制備工藝并建立其指紋圖譜;③按《中國藥典》（2010年版）四味土木香散項下含量測定方法對四味土木香散凍干粉中異土木香內酯、土木香內酯進行含量測定。(2)建立四味土木香散血中移行成分的分析方法:①采用液-液萃取法、固相萃取法

2、及有機溶劑沉淀法對血清樣品預處理方法進行篩選;②利用紫外分光光度法測定經(jīng)4倍甲醇、乙腈處理后蛋白質的含量;③取給藥30-180min后的大鼠經(jīng)肝門靜脈、腹主動脈采集的含藥血清，采用有機溶劑沉淀法，利用HPLC法確定最佳采血時間點。(3)采用UPLC-Q-Exactive/MS法鑒定來源于藥物的血中移行成分。(4)以不同濃度四味土木香散凍干粉經(jīng)口給藥后的含藥血清為研究對象，采用FRAP法測定四味土木香散含藥血清的總抗氧化活性。
　　

3、結果:(1)在原料藥材合格的基礎上，制備了給藥用四味土木香散凍干粉，其各批次HPLC指紋圖譜相似度均在0.9以上，同時測定了四味土木香散凍干粉中異土木香內酯、土木香內酯的含量，分別不低于0.30 mg/g、0.41 mg/g;(2)對血清樣品預處理方法進行了篩選，并比較了經(jīng)4倍甲醇與乙腈處理后蛋白質的含量測定，結果兩種沉淀方法均能將血清中90％以上的蛋白質除去，在最佳采血時間點的選擇中用此兩種方法進行血清樣品的前處理，確定給藥90min

4、后經(jīng)肝門靜脈采血乙腈沉淀處理方法為最佳入血成分分析方法;(3)共鑒定了來源于四味土木香散中的11個入血成分，并進行了歸屬。(4)比較了不同濃度給藥樣品的抗氧化活性，結果顯示四味土木香散凍干粉的給藥濃度在0.8-1.6g/ml之間的含藥血清均有抗氧化活性，且給藥濃度與其抗氧化活性呈量效關系。
　　結論:本實驗通過四味土木香散血中移行成分及其血清藥理作用的研究，從大鼠含藥血清中共鑒定了11個入血成分，該11個血中移行成分均來源于四個單