Tim-3分子在胃癌髓源性抑制性細(xì)胞上的表達(dá)及其生物學(xué)功能.pdf

1、【目的】
　　檢測(cè)Tim-3分子在胃癌荷瘤個(gè)體髓源性抑制性細(xì)胞上的表達(dá)水平,并探討Tim-3在胃癌發(fā)生和發(fā)展中的作用。
　　【方法】
　　1.收集2013年2月~2013年11月蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院收治的初診胃癌患者(46例)及健康對(duì)照者(25例)外周血標(biāo)本。流式細(xì)胞儀檢測(cè)胃癌患者及對(duì)照組外周血中MDSCs上Tim-3的表達(dá)水平,并分析其與胃癌患者各臨床病理特征的關(guān)系。
　　2.構(gòu)建胃癌荷瘤小鼠模型并檢測(cè)不同時(shí)間

2、荷瘤小鼠外周血、脾臟及腫瘤浸潤(rùn)組織中MDSCs上Tim-3的表達(dá)水平,動(dòng)態(tài)研究MDSCs表達(dá)Tim-3規(guī)律。
　　3.采用CFSE染色法共培養(yǎng)T細(xì)胞與MDSCs,并加入Tim-3阻斷抗體進(jìn)行干預(yù),96小時(shí)后流式細(xì)胞儀檢測(cè)T細(xì)胞增殖情況。
　　【結(jié)果】
　　1.胃癌組外周血中CD14+HLA-DR-/lowMDSCs上Tim-3在的表達(dá)水平(?x±s,％)(32.57±15.887,％)高于對(duì)照組(7.52±5.943,

3、％),差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)。
　　2.胃癌患者Tim-3在外周血中CD14+HLA-DR-/lowMDSCs上的表達(dá)水平與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、臨床分期的分組中有顯著差異(P<0.01),而在患者年齡、性別、腫瘤直徑、病理分化級(jí)別、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等各組中的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(M1)的胃癌患者CD14+HLA-DR-/lowMDSCs上Tim-3表達(dá)水平顯著高于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(M0)者,分別為(4

4、2.34±11.857,％)、(27.36±15.435,％),P=0.0015,差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者(35.82±15.299,％)較Ⅰ-Ⅱ期患者(18.40±5.956,％)明顯增加,差異具備顯著性(P=0.0030)。單因素方差分析不同分期胃癌患者的Tim-3表達(dá)水平,結(jié)果顯示Ⅳ期(42.34±11.857,％)胃癌患者明顯高于Ⅰ-Ⅱ期(18.40±5.956,％)以及Ⅲ期(31.07±16.000,％),差異

5、有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0006)。
　　3.胃癌荷瘤小鼠外周血中 MDSCs上 Tim-3的表達(dá)水高于對(duì)照組,分別為(22.24±12.312,％)、(6.31±1.808,％),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。單因素分析不同荷瘤時(shí)間Tim-3在小鼠外周血中MDSCs上的表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)荷瘤23天組的小鼠 Tim-3的表達(dá)水平(40.93±2.663,％)明顯高于荷瘤8天組(11.50±1.127,％)、荷瘤13天組(13.6

6、1±2.410,％)和荷瘤18天組(22.93±3.140,％),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)。
　　4.Tim-3在荷瘤組小鼠脾臟中MDSCs上的表達(dá)水平(15.51±7.631,％)高于對(duì)照組(3.46±1.126,％),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Tim-3在不同荷瘤時(shí)間小鼠脾臟中 MDSCs上的表達(dá)水平分別為荷瘤8天組(5.62±2.396,％)、荷瘤13天組(12.80±0.200,％)、荷瘤18天組(18

7、.80±2.606,％)和荷瘤23天組(24.83±1.795,％),單因素分析顯示差異具顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)。
　　5.隨著腫瘤的生長(zhǎng),Tim-3在腫瘤組織浸潤(rùn)的MDSCs上的表達(dá)水平逐漸升高,荷瘤23天組高于荷瘤8天組、荷瘤13天組及荷瘤18天組,分別為(54.33±7.560,％)、(12.83±1.124,％)、(27.50±1.153,％)和(30.97±2.301,％),差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.00

8、01)。
　　6.各組腫瘤組織浸潤(rùn)的MDSCs上的Tim-3的表達(dá)水平均高于脾臟,而在小鼠荷瘤13天后各組腫瘤組織中Tim-3的表達(dá)水平也高于外周血(P<0.05)。
　　7.T細(xì)胞+MDSCs組增殖的T細(xì)胞所占比例為(35.43±11.357,％),低于T細(xì)胞組(72.47±2.532,％)及T細(xì)胞+MDSCs+Tim-3阻斷抗體組(62.00±1.552,％),P=0.0014,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　【結(jié)論】

9、r>　　1.Tim-3在胃癌患者外周血中 CD14+HLA-DR-/lowMDSCs上的表達(dá)水平上調(diào),且與患者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況、TNM臨床分期有關(guān)。有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、分期晚的胃癌患者明顯高于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、分期早者。提示Tim-3可能成為判斷胃癌預(yù)后的潛在指標(biāo)。
　　2.荷瘤組小鼠外周血及脾臟中MDSCs上Tim-3的表達(dá)水平均高于對(duì)照組。隨著胃癌腫瘤的生長(zhǎng),Tim-3在外周血、脾臟、腫瘤組織浸潤(rùn)的MDSCs上的表達(dá)水平逐漸升高,且腫瘤組織明顯