低劑量雙酚A對(duì)斑馬魚世代發(fā)育、神經(jīng)和生殖毒性的研究.pdf

1、雙酚A(BPA)是工業(yè)上一種重要的化工原料，廣泛存在于我們的生活當(dāng)中，主要用于粘合劑、防老化劑、建筑材料、磁盤、電器或電子元件包裝、罐頭內(nèi)包裝、以及食品和飲料包裝等材料的生產(chǎn)。隨著塑料制品的廣泛應(yīng)用，雙酚A已經(jīng)造成了嚴(yán)重的環(huán)境污染。其廣泛存在于工業(yè)廢水和各類污水中，地表水、江河、湖泊也均有BPA的存在。并且，在人的母乳、血清、尿液中都能檢測到不同濃度的雙酚A。
　　BPA結(jié)構(gòu)與β-雌二醇類似，能夠結(jié)合細(xì)胞內(nèi)的雌激素受體，并通過多種

2、機(jī)制產(chǎn)生擬雌激素或抗雌激素作用，對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)的正常功能造成一定的干擾，導(dǎo)致生物內(nèi)分泌失調(diào)。另外，歐盟的相關(guān)研究認(rèn)為，使用含雙酚A的奶瓶可能會(huì)誘發(fā)嬰兒性早熟。因此，BPA在公共衛(wèi)生領(lǐng)域引起了大家的廣泛關(guān)注。
　　盡管目前關(guān)于雙酚A的毒理學(xué)研究已經(jīng)非常廣泛了，但對(duì)于水生生物的研究卻相對(duì)較少。另外，以水生生物為實(shí)驗(yàn)材料的大部分研究中，均采用靜水暴露方式進(jìn)行雙酚A處理，且暴毒時(shí)間較短，世代暴毒的研究更是極少。
　　本文以模式生物斑馬

3、魚為研究材料，通過顯微注射與靜水暴露兩種方式對(duì)斑馬魚進(jìn)行連續(xù)兩個(gè)世代的雙酚A處理，觀察兩種方式對(duì)斑馬魚世代的發(fā)育、神經(jīng)以及生殖毒性。顯微注射方式中，斑馬魚胚胎中BPA的終濃度分別為0ng/ml、0.4ng/ml、2ng/ml、10ng/ml、50ng/ml;水體暴露方式中，BPA在水體中的終濃度為1 nmol/L。根據(jù)第一代的研究成果，本實(shí)驗(yàn)著重研究了顯微注射BPA對(duì)斑馬魚子代仔魚的神經(jīng)毒性，以及水體暴露BPA對(duì)斑馬魚生殖、胚胎發(fā)育與神

4、經(jīng)的毒性效應(yīng)。
　　神經(jīng)方面的研究主要包括仔魚120dpf的光刺激實(shí)驗(yàn)與活力實(shí)驗(yàn)。發(fā)育方面為子代胚胎孵化率、畸形率與死亡率的統(tǒng)計(jì)以及交叉實(shí)驗(yàn)。生殖毒性的研究包括雄性成魚180dpf精子總活力、活躍精子活力、精子密度、精子運(yùn)動(dòng)速率的檢測，精子內(nèi)ATP含量與脂質(zhì)過氧化物MDA含量的檢測，以及精子的單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)。
　　本次研究結(jié)果顯示:顯微注射低劑量BPA對(duì)斑馬魚仔魚的神經(jīng)毒性較明顯，子一代120dpf仔魚的活力顯著下降，而

5、發(fā)育與生殖毒性不明顯。可能是由于顯微注射的劑量較低且BPA半衰期較短，導(dǎo)致注射的雙酚A在發(fā)育過程中被自身完全代謝。長期水體暴毒組斑馬魚子代120hpf仔魚的活力顯著下降，且光暗循環(huán)刺激實(shí)驗(yàn)中運(yùn)動(dòng)速率較對(duì)照組低。說明長期水體暴露BPA也會(huì)影響斑馬魚子代仔魚的神經(jīng)發(fā)育，降低其活力以及對(duì)光暗循環(huán)刺激的敏感性。長期水體暴露BPA對(duì)斑馬魚的生殖毒性較顯著。BPA會(huì)降低雄性成魚的精子質(zhì)量，但不會(huì)損傷其DNA。具體表現(xiàn)為:實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，水體暴毒組180

6、dpf成年雄魚精子活力、活躍精子活力、精子密度、精子運(yùn)動(dòng)速率均下降，ATP含量降低而MDA含量升高，精子單細(xì)胞凝膠電泳結(jié)果中未發(fā)現(xiàn)拖尾。另外，親代水體暴毒而子代非水體暴毒組雄魚的精子質(zhì)量低于對(duì)照組的正常雄魚，但仍高于親代子代均水體暴毒組的雄魚。我們認(rèn)為，該結(jié)果的出現(xiàn)或許是因?yàn)樗w暴露BPA對(duì)斑馬魚的生殖毒性具有遺傳效應(yīng)與毒物依賴性。統(tǒng)計(jì)斑馬魚胚胎的孵化、畸形與死亡率，并用交叉實(shí)驗(yàn)佐證后發(fā)現(xiàn)，長期水體暴露BPA對(duì)雄性成魚的生殖毒性大于雌性