鞍帶石斑魚種苗人工繁育技術(shù)研究.pdf

1、本研究采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA(RandomlyamplifiedpolymorphicDNA，RAPD)技術(shù)分析海南近海野生鞍帶石斑魚群體的遺傳多樣性，并開展以海南野生鞍帶石斑魚作為親魚的人工催產(chǎn)和苗種繁育實(shí)驗(yàn)，觀察了胚胎發(fā)育的過程及仔稚幼魚的形態(tài)發(fā)育和生長(zhǎng)特征，對(duì)人工育苗中不同的仔魚開口餌料進(jìn)行了篩選，還開展了鞍帶石斑魚池塘人工育苗技術(shù)的研究。主要研究結(jié)果如下： 采用RAPD技術(shù)對(duì)海南近海野生鞍帶石斑魚群體的遺傳多樣性進(jìn)行檢測(cè)

2、，從48個(gè)隨機(jī)引物中篩選出20個(gè)引物對(duì)鞍帶石斑魚的DNA進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)果共檢測(cè)出131個(gè)位點(diǎn)，其多態(tài)位點(diǎn)比例(P)為48.09％；利用RAPDdistance1.04軟件獲得海南野生鞍帶石斑魚群體21個(gè)個(gè)體間的遺傳距離矩陣，依此計(jì)算出個(gè)體間平均遺傳距離(P)為0.2650，個(gè)體間平均遺傳相似系數(shù)(S)為0.7350；利用POPGENE1.3軟件計(jì)算出Shannon遺傳多樣性指數(shù)(H0)為0.2266；通過與其他種類的石斑魚群體的RAPD分

3、析結(jié)果比較可知，海南近海野生鞍帶石斑魚群體仍保持著較豐富的遺傳多樣性。因此在海南發(fā)展鞍帶石斑魚的養(yǎng)殖業(yè)，選擇海南近海的野生鞍帶石斑魚作為親本進(jìn)行人工繁殖的遺傳基礎(chǔ)較好。 從2001年開始蓄養(yǎng)100多尾鞍帶石斑魚，自3齡開始強(qiáng)化培育作為親魚，共存活34尾，其中8尾自然性轉(zhuǎn)變?yōu)樾坌杂H魚。進(jìn)入繁殖季節(jié)后使用絨毛膜促性腺激素HCG400～500IU/kg魚體重和促黃體釋放激素類似物L(fēng)RH-A35～6ug/kg魚體重進(jìn)行催產(chǎn)，共進(jìn)行三次催

4、產(chǎn)，獲得受精卵725g，受精率3.27％～7.53％。結(jié)果表明在網(wǎng)箱養(yǎng)殖條件下6齡雄性親魚自然性轉(zhuǎn)變的數(shù)量不多且成熟度不高。 詳細(xì)觀察并描述了從受精卵到初孵仔魚的25個(gè)具體發(fā)育時(shí)期的形態(tài)特征和發(fā)育時(shí)間。鞍帶石斑魚的胚胎發(fā)育劃分為卵裂期、囊胚期、原腸胚期和器官形成期。在水溫28.5～30.0℃、鹽度31、pH7.95的海水中，鞍帶石斑魚胚胎歷時(shí)14h23min完成整個(gè)胚胎發(fā)育孵化出膜。根據(jù)卵黃囊、鰭、鱗片、體色的變化，鞍帶石斑魚的

5、胚后發(fā)育可分為仔魚期、稚魚期和幼魚期；仔魚期根據(jù)卵黃囊的有無，可分為卵黃囊仔魚和后期仔魚。鞍帶石斑魚胚后發(fā)育經(jīng)歷了3次重要的生長(zhǎng)變化，分別是：1)仔魚剛孵化后至1日齡期間，仔魚全長(zhǎng)增長(zhǎng)較快，出現(xiàn)第一次快速生長(zhǎng)；2)仔魚至8日齡時(shí)，開始長(zhǎng)出背鰭棘和腹鰭棘，仔魚生長(zhǎng)出現(xiàn)第二次加速；3)仔魚從16日齡起，全長(zhǎng)增長(zhǎng)進(jìn)入高速生長(zhǎng)期直至進(jìn)入幼魚階段；鞍帶石斑魚生長(zhǎng)發(fā)育過程中最明顯的變化是腹鰭第一鰭棘與背鰭第二鰭棘的長(zhǎng)出與收回。 在人工育苗條

6、件下投喂不同生物餌料作為鞍帶石斑魚仔魚的開口餌料，在孵化后7d內(nèi)連續(xù)測(cè)定各組的存活率，并測(cè)定仔魚孵化后第5d時(shí)對(duì)中型輪蟲的攝食強(qiáng)度和攝食發(fā)生率。結(jié)果表明：投喂原生動(dòng)物作為開口餌料的A組存活率在孵化后第7d時(shí)的存活率最高，為28.12％；對(duì)輪蟲的攝食強(qiáng)度和攝食發(fā)生率也是以原生動(dòng)物作為開口餌料的A組最高，分別為4.8/尾和90％。此結(jié)果表明在鞍帶石斑魚人工育苗中可以使用原生動(dòng)物作為仔魚開口的適口餌料。 根據(jù)海水魚類種苗繁育的基本原理

7、并結(jié)合鞍帶石斑魚的生物學(xué)特性，特別是仔稚魚生長(zhǎng)發(fā)育特征，針對(duì)目前鞍帶石斑魚人工育苗技術(shù)中存在的主要問題，研究開發(fā)了鞍帶石斑魚的池塘育苗技術(shù)。經(jīng)過32天的培育，在池塘中共培育出平均全長(zhǎng)為31.86mm的鞍帶石斑魚幼魚1.5×104尾，成活率2.83％；在水溫27.0℃～32.0℃的條件下，魚苗日平均生長(zhǎng)0.97mm，孵化后14d后，魚苗生長(zhǎng)速度加快，日平均生長(zhǎng)1.42mm;通過解剖仔魚的消化道表明，仔魚在池塘條件下主要以原生動(dòng)物和輪蟲幼蟲