?；撬釋π睅唪~抗氧化能力的影響.pdf

1、1.飼料中牛磺酸水平對斜帶石斑魚生長性能、抗氧化能力的影響
　　配制添加0、0.5％、1％、1.5％?；撬岬娘暳贤段剐睅唪~幼魚，通過56天的養(yǎng)殖實驗，測定斜帶石斑魚生長性能各相關(guān)指標(biāo):SR、WGR、DFI、FE、SGR和CF。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼料中添加?；撬峋哂忻黠@的促生長作用。當(dāng)?；撬崛狈r，石斑魚表現(xiàn)出較差的生長性能。牛磺酸添加組斜帶石斑魚DFI隨著?；撬崽砑恿康脑黾佣撸以?％?；撬崴较逻_(dá)到最高，與對照組差異顯著(P＜0

2、.05)。FE的變化趨勢與DFI相同。WGR和SGR隨著?；撬崴缴呦壬蠼担谂；撬崴綖?％時最高。因此，1％的?；撬崴綄τ谛睅唪~的促生長作用最為明顯。
　　飼料中添加不同水平的?；撬峋軌蝻@著提高肝臟、肌肉、血清中主要抗氧化酶:SOD、CAT、GSH-Px活性以及T-AOC，顯著降低MDA含量。其中，飼料中添加1％的?；撬釋τ谛睅唪~的抗氧化能力提高以及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的清除效果最佳，并且與對照組、其余實驗組差異顯著

3、(P＜0.05)。這與生長性能實驗的效果相一致，因此飼料中1％的?；撬崽砑恿孔钣欣谛睅唪~生長及抗氧化能力的提高。
　　2.斜帶石斑魚原代培養(yǎng)肝細(xì)胞四氯化碳氧化損傷模型的建立
　　本實驗利用肝細(xì)胞體外培養(yǎng)模型，采用CCl4作為氧化損傷毒物構(gòu)建肝細(xì)胞四氯化碳氧化損傷模型，研究不同CCl4濃度(0、4、8、16mM)在不同作用時間(2、4、8h)下對于斜帶石斑魚離體肝細(xì)胞的損傷作用。實驗采用MTT法檢測肝細(xì)胞活性，并測定肝細(xì)

4、胞培養(yǎng)上清液中GPT、GOT和LDH活性以及抗氧化相關(guān)指標(biāo)(SOD、CAT、GSH-Px、MDA)。結(jié)果顯示，不同濃度CCl4均能夠降低細(xì)胞活力，4mM時與8mM時差異不顯著(P＞0.05)，但8mM時顯著高于16mM(P＜0.05)。CCl4作用4h時肝細(xì)胞活力降低程度顯著低于作用8h(P＜0.05)。CCl4濃度為8mM時作用4h能夠顯著增加GPT、GOT、LDH的釋放量(P＜0.05)。8mM的CCl4作用4h能夠顯著降低SOD、

5、CAT活性(P＜0.05)，顯著提高M(jìn)DA含量(P＜0.05)。因此，8mM可作為CCl4氧化損傷模型的最佳損傷濃度，CCl4作用4h可作為損傷實驗最適作用時間，以此作為牛磺酸保護(hù)作用的實驗依據(jù)。
　　3.?；撬釋π睅唪~原代培養(yǎng)肝細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用
　　本實驗以CCl4肝細(xì)胞氧化損傷模型為基礎(chǔ)，采用?；撬釋κ軗p的斜帶石斑魚肝細(xì)胞進(jìn)行預(yù)先保護(hù)和損傷修復(fù)。采用三種不同的作用方式加入牛磺酸（?；撬崆疤幚?CCl4損傷肝細(xì)胞

6、之前加入?；撬??；撬崆昂筇幚?CCl4損傷肝細(xì)胞前后均加入牛磺酸;?；撬岷筇幚?CCl4損傷肝細(xì)胞之后加入牛磺酸），每種作用方式加入三種不同濃度?；撬?5mM、10mM、15mM。同時，設(shè)立空白對照組、CCl4對照組、?；撬釋φ战M，對照組和處理組均作用相同時間。通過測定培養(yǎng)上清液中肝細(xì)胞活力，肝細(xì)胞功能指標(biāo)，抗氧化酶活力以及抗氧化酶基因表達(dá)量，探究離體條件下牛磺酸對斜帶石斑魚肝細(xì)胞保護(hù)作用，確定?；撬嶙罴炎饔梅绞胶妥钸m濃度。結(jié)果表明，

7、?；撬岬募尤刖軌蝻@著提高斜帶石斑魚肝細(xì)胞的活力(P＜0.05)。牛磺酸前處理組和牛磺酸前后處理組在濃度為10mM時細(xì)胞活力最高，而牛磺酸后處理組則在15mM時最高。?；撬崆疤幚斫M和?；撬崆昂筇幚斫M在10mM牛磺酸濃度時能夠顯著抑制肝細(xì)胞GPT、GOT、LDH的活性(P＜0.05)，?；撬岷筇幚斫M在濃度為15mM時GPT、GOT和LDH活性才顯著下降?？寡趸芰Ψ矫?，?；撬釋φ战M能夠顯著提高SOD、CAT酶活性(P＜0.05)，?；撬崆?/p>

8、處理組和前后處理組的SOD酶活性隨著?；撬釢舛壬叱尸F(xiàn)先升高后降低的趨勢，在10mM時活性最高。?；撬岷筇幚斫MSOD酶活性則隨牛磺酸濃度升高逐漸上升，最大值出現(xiàn)在15mM時，并且顯著高于5mM和10mM（P＜0.05）。CAT活性的變化趨勢與SOD相似。GSH-Px酶活性在牛磺酸前處理組和前后處理組隨著?；撬釢舛壬叱霈F(xiàn)先升高后降低，10mM時活性最高，且顯著高于5mM(P＜0.05)，牛磺酸后處理組則在15mM時活性最高。MDA含量在

9、CCl4組時最高，且顯著高于其余各組（P＜0.05）。牛磺酸的加入顯著降低了MDA含量(P＜0.05)，?；撬崆疤幚斫M、后處理組和前后處理組的MDA含量均在10mM濃度時最低。由抗氧化酶基因表達(dá)量可以看出，CCl4顯著下調(diào)了抗氧化酶基因的表達(dá)水平(P＜0.05)，?；撬岬募尤肽軌蝻@著影響抗氧化酶基因的表達(dá)水平(P＜0.05)。SOD、CAT酶基因表達(dá)量隨?；撬釢舛壬呦壬吆蠼档?，10mM的表達(dá)量最高。GSH-Px酶基因表達(dá)量則隨著牛磺