食用菌栽培相關(guān)木霉的調(diào)查和分析.pdf

1、本文從木霉污染的食用菌菌筒和子實(shí)體中分離純化了49株木霉菌株。采用形態(tài)學(xué)方法以及ITS/5.8S測序分析，對(duì)這些木霉進(jìn)行了分類鑒定。結(jié)果表明，中國福建、浙江等省食用菌栽培相關(guān)木霉以哈茨木霉和長枝木霉為主，少量為深綠木霉和棘孢木霉；木霉的種類與采集地點(diǎn)、受污染食用菌的種類有一定相關(guān)，如在浙江慶元香菇菌筒中分離的木霉主要是哈茨木霉，在廣州刺芹側(cè)耳(杏孢菇)菌筒中分離的木霉主要是棘孢木霉，而從福建浦城香菇菌筒中分離的木霉主要是深綠木霉。哈茨木

2、霉、長枝木霉、深綠木霉和棘孢木霉的ITS總長分別為：575 bp-578 bp、579 bp-583 bp、565 bp-567 bp、和560 bp-561 bp，GC含量分別為：55.6％-56.7％、57.2％-58％、55.6％-56.1％和55.8％-55.9％，充分體現(xiàn)了木霉屬ITS的長度多態(tài)性；ITS1序列總長分別為：221bp-233bp、248 bp-255 bp、214 bp-216 bp和213 bp-214 bp

3、，GC含量分別為：55.4％-57.4％、57.5％-58.7％、55.4％-55.6％和55.6％-55.9％；ITS2序列總長分別為：185bp-188 bp、168 bp-183bp、189 bp-192 bp和188 bp，GC含量分別為：63.1％-65.6％、66.1％-67.9％、62.9％-64.7％和63.8％；所有木霉5.8S完全相同，總長為：159 bp，GC含量為：46.5％。ITS序列最適合用作分類鑒定標(biāo)記，I

4、TS1不適合用作長枝木霉的分類鑒定，ITS2則種間差異較小的木霉不能得到很好的區(qū)分。不同菌株的木霉其RAPD條帶，生長最適溫度、pH值、培養(yǎng)基含水量都有所不同，顯示了食用菌栽培相關(guān)木霉具有多樣性。木霉對(duì)5種食用菌栽培常用消毒劑敏感性測定，顯示在同等條件下多菌靈和甲基托布津?qū)δ久挂种菩Ч詈?，百菌清效果次之，之后是大生，甲霜靈不太適宜在食用菌栽培中當(dāng)作防霉劑使用。 本文還研究了49株木霉對(duì)食用菌菌絲的侵染能力，發(fā)現(xiàn)不同木霉的侵染能

5、力不同，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，對(duì)食用菌侵染能力強(qiáng)的木霉對(duì)植物病原真菌的侵染能力并不一定強(qiáng)，表現(xiàn)出木霉對(duì)真菌侵染的特異性。本文還探討了木霉侵染食用菌的機(jī)理，結(jié)果顯示，木霉可通過溶壁、纏繞等方式作用于食用菌菌絲細(xì)胞壁，木霉發(fā)酵液對(duì)食用菌和植物病原菌都有很好的抑制作用。木霉幾丁質(zhì)酶活性與侵染性沒有直接關(guān)聯(lián)：木霉侵染性強(qiáng)的菌株幾丁質(zhì)酶活性不一定高，產(chǎn)酶活性高的菌株侵染能并不一定強(qiáng)。幾丁質(zhì)酶活性、幾丁質(zhì)酶基因序列及氨基酸序列均與木霉的種類無關(guān)，如：同為深綠

6、木霉的66和69，幾丁質(zhì)酶活性分別為：0.0204U/mL.min和0.0044U/mL.min，前者約是后者的5倍；不同種類的木霉可以有相似的幾丁質(zhì)酶序列。幾丁質(zhì)酶活性與侵染性無關(guān)，如木霉52無論在植物病原菌還是在食用菌中侵染性都很強(qiáng)，但其幾丁質(zhì)酶活性最弱。木霉幾丁質(zhì)酶基因序列和氨基酸序列與侵染性有一定關(guān)系，侵染性強(qiáng)的棘孢木霉29和深綠木霉52同為一類；侵染能力弱的棘孢木霉30和長枝木霉33同聚一類；侵染能力中的哈茨木霉45單獨(dú)聚為一

7、類，深綠木霉66侵染能力強(qiáng)也單獨(dú)聚為一類。木霉纖維素酶活性與侵染性沒有直接關(guān)聯(lián)。侵染性強(qiáng)的菌株有木霉4、29、52和66，侵染性中的菌株有木霉19、38、63和69，侵染性弱的菌株有木霉28、30、37和70，但產(chǎn)纖維素酶活性強(qiáng)的菌株有木霉29和63，產(chǎn)酶活性中等的菌株有木霉19、28、30、37、38、52、66、69和70，產(chǎn)酶活性弱的菌株有木霉4號(hào)。纖維素酶活性、纖維素酶基因序列和氨基酸序列均與木霉的種類無關(guān)?？寺〉玫降?個(gè)木霉纖