羊泰勒蟲核苷酸合成代謝途徑初步分析及OPRT蛋白的免疫保護(hù)試驗(yàn).pdf

1、羊泰勒蟲病是由媒介蜱傳播的泰勒科泰勒屬的原蟲寄生于綿羊和山羊的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞內(nèi)而引起的疾病的總稱，它給全球養(yǎng)羊業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究運(yùn)用生物信息學(xué)初步分析了羊泰勒蟲蛋白組的核酸合成代謝路徑，進(jìn)行了乳清酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(OPRT)基因的克隆表達(dá)，以及rOPRT的綿羊保護(hù)性效果評價(jià)。其研究結(jié)果如下:
　　1.對尤氏泰勒蟲、呂氏泰勒蟲兩個(gè)種的六個(gè)地方株的蛋白組進(jìn)行核苷酸代謝途徑初步分析，用COG的聚類分析結(jié)果表明，與

2、核苷酸代謝相關(guān)的蛋白有5個(gè)，其中4個(gè)參與從頭合成途徑，只有一個(gè)參與補(bǔ)救途徑。其中乳清酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶、腺苷酸激酶分別為從頭合成途徑、補(bǔ)救途徑的關(guān)鍵酶，具有重要的研究意義。
　　2.克隆和表達(dá)了尤氏泰勒蟲oprt基因的功能區(qū)片段，并對重組蛋白rOPRT的反應(yīng)原性進(jìn)行分析。結(jié)果表明oprt基因的表達(dá)產(chǎn)物為包涵體蛋白，rOPRT除與尤氏泰勒蟲陽性血清反應(yīng)外，也與呂氏泰勒蟲和綿羊泰勒蟲陽性血清發(fā)生交叉反應(yīng)。證實(shí)oprt同源基因也存在于呂氏

3、泰勒蟲和綿羊泰勒蟲。
　　3.動(dòng)物保護(hù)性實(shí)驗(yàn)完成了rOPRT對綿羊免遭尤氏泰勒蟲感染的保護(hù)效果評估。結(jié)果表明，對照組綿羊發(fā)燒持續(xù)時(shí)間明顯長于免疫組，與對照組相比，免疫組綿羊帶蟲期明顯縮短。對照組實(shí)驗(yàn)綿羊分別在攻蟲血后第25天、26天、29天出現(xiàn)高蟲血癥，而免疫組則分別出現(xiàn)在第26天、32天和33天，明顯比對照組出現(xiàn)的晚。血紅蛋白含量測定的結(jié)果顯示，對照組的血紅蛋白含量(Hb)顯著下降，而實(shí)驗(yàn)組Hb變化較小。同時(shí)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和臨床癥狀