人類鼻息肉組織基因表達(dá)特征的DNA芯片研究和Clara細(xì)胞10-kDa蛋白對(duì)呼吸道上皮細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞功能影響的初步研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文人類鼻息肉組織基因表達(dá)特征的DNA芯片研究和Clara細(xì)胞10kDa蛋白對(duì)呼吸道上皮細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞功能影響的初步研究姓名：劉爭(zhēng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師：孔維佳BruceS.Bochner20040501華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院2001級(jí)博士學(xué)位論文鼻息肉病(nasalpolyposis，NP)是上呼吸道的慢性炎癥性疾病，總是和慢性鼻鼻竇炎(chrorJcrhinosinusitis，CRS)

2、合并發(fā)生。NP是耳鼻咽喉科的常見(jiàn)病和多發(fā)病，它嚴(yán)重影響著患者的生活質(zhì)量，并加重著患者和社會(huì)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。近10年，雖然有關(guān)NP和CRS的發(fā)病機(jī)理的研究有了不少的進(jìn)展，但還遠(yuǎn)未達(dá)到徹底闡明的程度。l臨床上，以抗生素，激素和手術(shù)為主的治療也并不令人滿意。因此，NP的病理生理過(guò)程還有待人們的進(jìn)一步深入了解，以便研究和發(fā)現(xiàn)新的治療手段的，提高治療水平。DNA芯片技術(shù)的誕生為人類疾病的研究提供了高效，有力的手段。DNA芯片由特殊的基質(zhì)組成，其上附著

3、著數(shù)以千萬(wàn)計(jì)的核苷酸序列，可以同時(shí)檢測(cè)大量的人類基因的表達(dá)。比較疾病組織和健康組織的基因表達(dá)譜的差異往往可以揭示一些預(yù)料之中的和一些未曾被懷疑的病理過(guò)程。本研究中，采用cDNA芯片技術(shù)，我們比較了NP組織和正常鼻竇組織的基因表達(dá)譜和特征。同正常鼻竇粘膜相比，我們發(fā)現(xiàn)在NP組織中有348個(gè)異常表達(dá)的基因，其中多數(shù)未被既往的研究文獻(xiàn)報(bào)道過(guò)。作為對(duì)基因芯片研究結(jié)果的初步驗(yàn)證，我們利用實(shí)時(shí)定量∞aI—time)RT—PCR技術(shù)和免疫組織化學(xué)技術(shù)

4、對(duì)基因芯片研究中5個(gè)異常表達(dá)顯著的基因在mRNA和蛋白水平進(jìn)行了重復(fù)檢測(cè)。結(jié)果證實(shí)了80％的基因的異常表達(dá)。在異常表達(dá)的基因中，CCl0是下調(diào)表達(dá)最顯著的基因，文獻(xiàn)報(bào)道CCl0具有免疫調(diào)節(jié)和抗炎癥的作用。因此，我們推測(cè)NP組織中CCl0表達(dá)的減弱，可IIII重了NP組織的炎癥過(guò)程和局部免疫平衡的紊亂，促進(jìn)了NP的發(fā)生，發(fā)展。上皮細(xì)胞是NP組織的主要結(jié)構(gòu)細(xì)胞，而嗜酸性粒細(xì)胞則是主要的炎性浸潤(rùn)細(xì)胞，二者功能的異常在NP的發(fā)病中占重要地位，為